天然丙烯基苯化合物微生物轉(zhuǎn)化和代謝的研究.pdf

1、本文通過(guò)從果園土樣中篩選耐受高濃度丁香酚和異丁香酚的微生物、檢驗(yàn)菌株代謝底物能力，獲得了一株能夠在10gl-1異丁香酚濃度下生長(zhǎng)的菌株HS8，確定其可以代謝異丁香酚并產(chǎn)生香蘭素。 文章采用氣相色譜/高分辨質(zhì)譜聯(lián)用分析HS8轉(zhuǎn)化異丁香酚的產(chǎn)物，對(duì)HS8代謝異丁香酚的途徑進(jìn)行了研究。氣相色譜檢測(cè)到三種主要的異丁香酚代謝產(chǎn)物，通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的質(zhì)譜圖對(duì)比確定其中兩種化合物分別為香蘭素和脫氫二聚異丁香酚。而第三種化合物在數(shù)據(jù)庫(kù)中未搜索到完

2、全匹配的物質(zhì)，我們采用高分辨質(zhì)譜分析確定了分子量和分子式，并通過(guò)對(duì)該物質(zhì)的裂解研究，結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道，定性該物質(zhì)為異丁香酚二醇。本研究首次報(bào)道了異丁香酚二醇被檢測(cè)為枯草芽孢桿菌代謝異丁香酚到香蘭素的中間代謝物。采用HS8休止細(xì)胞轉(zhuǎn)化體系對(duì)香蘭素及其衍生物代謝進(jìn)行了研究。綜合實(shí)驗(yàn)結(jié)果，推測(cè)了B.subtilisHS8代謝異丁香酚產(chǎn)香蘭素的途徑：異丁香酚首先在丙烯基側(cè)鏈雙鍵處加氧，形成環(huán)氧異丁香酚，環(huán)氧化合物水解后形成異丁香酚二醇，進(jìn)一步代謝生

3、成香蘭素。香蘭素經(jīng)香蘭酸生成愈創(chuàng)木酚，或直接還原生成香蘭醇。以無(wú)細(xì)胞提取液作為粗酶檢測(cè)香蘭酸脫羧酶的酶活性達(dá)到563.9nmolmin-1(mgprotein)-1。HS8代謝異丁香酚產(chǎn)生的香蘭素、香蘭酸、愈創(chuàng)木酚在香料產(chǎn)業(yè)中都是有價(jià)值的化合物。脫氫二聚異丁香酚是兩分子異丁香酚脫氫聚合的產(chǎn)物。本工作首次確定了脫氫二聚異丁香酚是HS8轉(zhuǎn)化異丁香酚生成香蘭素的副產(chǎn)物。當(dāng)脫氫二聚異丁香酚大量生成時(shí)，異丁香酚轉(zhuǎn)化為香蘭素的量減少，降低了香蘭素的