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1、目的:研究血小板源性生長(zhǎng)因子-D(PDGF-D)在人胃癌組織及胃癌細(xì)胞株SGC7901中的表達(dá)及其臨床意義。
方法:用RT-PCR的方法檢測(cè)PDGF-D和PDGFRβ mRNA在58例人胃癌組織及其對(duì)應(yīng)的癌旁組織中的表達(dá)情況,分析其與臨床病理特征的關(guān)系。體外培養(yǎng)胃癌細(xì)胞株SCG7901,采用RT-PCR方法檢測(cè)PDGF-D與PDGFRβ mRNA的表達(dá)情況;將人重組PDGF-D蛋白分別以0、20、50、100、500、25
2、00、25000、250000pg/ml濃度加入人胃癌細(xì)胞株SCG7901中,采用四甲基偶氮唑藍(lán)比色法(MTT法)檢測(cè)胃癌細(xì)胞株SCG7901的增殖情況并畫(huà)出生長(zhǎng)曲線(xiàn);采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期變化。
結(jié)果:在胃癌組織及其相對(duì)應(yīng)的癌旁組織中PDGF-D mRNA表達(dá)率分別為98.28%(57/58)和87.93%(51/58),PDGFRβ mRNA表達(dá)率分別為72.41%(42/58)和53.45%(31/58),兩組比
3、較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);PDGFRβ與PDGF-D的mRNA表達(dá)呈正相關(guān)(R=0.400,p<0.05)。PDGF-D mRNA的表達(dá)水平與胃癌的淋巴結(jié)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)有關(guān)(p<0.05),與其它臨床病理特征無(wú)關(guān)(p>0.05)。PDGF-D與胃癌病人的無(wú)瘤生存時(shí)間有關(guān)(x2=4.627,p=0.031)。PDGF-D及PDGFRβ mRNA在胃癌細(xì)胞株中表達(dá);MTT檢測(cè)發(fā)現(xiàn)外源性PDGF-D蛋白可以促進(jìn)SGC7901細(xì)胞增
4、殖,濃度為0pg/ml的對(duì)照組與其它任意一組的吸光值差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.000),除500pg/ml、2500pg/ml、25000pg/ml與250000pg/ml組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05),其他各濃度處理組間兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);PDGF-D干預(yù)細(xì)胞后,細(xì)胞周期各時(shí)相分布發(fā)生變化,G0/G1期細(xì)胞比例實(shí)驗(yàn)組除20 pg/ml組外,其余各組與PDGF-D濃度為0pg/ml的對(duì)照組比較均降低,差異有
5、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05),S期細(xì)胞比例實(shí)驗(yàn)組除20 pg/ml、50 pg/ml組外,其余各組與PDGF-D濃度為0pg/ml的對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。細(xì)胞周期分析顯示外源性PDGF-D蛋白干預(yù)細(xì)胞后實(shí)驗(yàn)組G0/G1期細(xì)胞比例下降,S期細(xì)胞比例上升(p<0.05)。
結(jié)論:PDGF-D及PDGFRβ mRNA在人胃癌組織中高表達(dá);PDGF-D在胃癌的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)中可能起著重要的作用。檢測(cè)PD
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