大鼠血漿和組織百草枯濃度測定及預(yù)后.pdf

1、目的：百草枯（paraquat，PQ）為聯(lián)吡啶類速效除草劑，廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，中毒事件日益增多，常規(guī)治療效果差，病死率較高。本文分析影響PQ中毒預(yù)后的因素，進一步降低死亡率的必要條件，建立了大鼠血漿和組織中PQ的HPLC檢測方法，旨在為PQ中毒治療、預(yù)后提供試驗依據(jù)。 方法：1．樣品處理：取血漿或組織勻漿5000rpm離心5min，取上清液0．5 mL置試管中，加入35%高氯酸100μL，漩渦1 min，低溫高速（10800

2、r·min—1）離心5 min，取上清液20μL進樣。 2．色譜條件：DiaffionsiITMC18（250 mm×4．6 mm，5μm）色譜柱，流動相為0．1 mol·L—1磷酸緩沖液（含75 mmol·L—1庚烷磺酸鈉）—乙腈（88：12，VN），用三乙胺調(diào)pH至3．0，檢測波長為258 nm。 結(jié)果：1．所建立的方法中血漿或組織中的內(nèi)源性物質(zhì)不干擾PQ的測定。 2．在20～5000 ng·mL—1范圍內(nèi)線

3、性良好，定量下限可達20ng·mL—1。方法絕對回收率為87．5%，RSD均小于3%（n=5），批內(nèi)、批間精密度實驗RSD均小于7%（n=5）。方法相對回收率為99．1%，RSD均小于3%（n=5）。 3．用該法測定大鼠血漿和組織中PQ濃度。大鼠灌胃給50mg·kg—1后8h血漿PQ濃度為360．3±130．9 ng·mL—1，至第3天則不能檢出。大鼠灌胃給50mg·kg—1后，中毒3天內(nèi)，由于肺泡組織對PQ具有主動攝取和蓄積特

4、性，肺內(nèi)PQ濃度下降幅度最小，在中毒24h時甚至升高，可能與肺纖維化形成有關(guān)；腎組織中PQ濃度最高，但下降最快，但3天后下降幅度明顯放緩；與肺、腎組織相比，肝組織中PQ濃度最小。肺、肝至第14天不能檢出PQ，而腎則至第28天不能檢出。 結(jié)論：1．在樣本處理過程中，本實驗采用高氯酸直接沉淀蛋白的方法處理血漿或組織樣本，簡便快捷，且沉淀完全，在檢測中未見有干擾組分，且獲得了較高的回收率，精密度及準確度考察結(jié)果均顯示本方法符合生物樣本