成骨生長肽（OGP）鼻腔給藥系統(tǒng)的研制.pdf

1、成骨生長肽(Osteogenicgrowthpeptide，OGP)是一種具有促成骨作用的多肽類生長因子。已證實，該生長因子在加快骨折愈合，預(yù)防和治療骨質(zhì)疏松癥等方面有良好的效果。但是，作為多肽類生長因子，OGP的口服生物利用度低，長期注射給藥又不方便，患者順應(yīng)性差。為此，本文研制了具有良好生物利用度、方便給藥的OGP鼻腔給藥系統(tǒng)。經(jīng)Beagle犬藥物動力學(xué)研究證實，OGP鼻腔給藥系統(tǒng)經(jīng)鼻噴方式給藥后，OGP能迅速經(jīng)鼻粘膜吸收進入全身循

2、環(huán)，達到處方設(shè)計之要求。 本文首先建立OGP的反相高效液相色譜(RP-HPLC)分析方法，用于檢測大鼠在體鼻腔循環(huán)灌流液樣品中的OGP含量，并對方法的專屬性、線性范圍、定量限、檢測限、精密度和回收率等進行考察，結(jié)果表明該方法靈敏、準(zhǔn)確、可行。 其次，采用大鼠在體鼻腔循環(huán)灌流法篩選OGP鼻腔給藥系統(tǒng)的粘膜吸收促進劑和酶抑制劑，并考察OGP大鼠在體鼻腔灌流方法的各種影響因素，包括灌流裝置對OGP的吸附作用、OGP在不同處方中

3、的穩(wěn)定性以及在體鼻腔循環(huán)灌流過程中灌流液的體積、pH值變化等，同時還對OGP大鼠鼻腔循環(huán)灌流液樣品在4℃貯存條件下的穩(wěn)定性進行考察。結(jié)果表明在灌流過程中，OGP在處方中本身較穩(wěn)定，灌流液體積變化微小，灌流裝置對OGP基本無吸附作用，鼻腔循環(huán)灌流液樣品中的OGP于4℃條件下較穩(wěn)定。上述結(jié)果提示，采用大鼠在體鼻腔循環(huán)灌流法來篩選OGP鼻腔給藥系統(tǒng)的粘膜吸收促進劑和酶抑制劑是可行的。 在處方篩選過程中，以鼻腔循環(huán)灌流液中OGP濃度的下

4、降百分率為指標(biāo)，通過大鼠在體鼻腔循環(huán)灌流吸收試驗，篩選粘膜吸收促進劑。在以灌流液配制的OGP溶液體外孵育試驗中，發(fā)現(xiàn)OGP的降解速度甚快，分析其原因，認(rèn)為是大鼠鼻粘膜中存在的蛋白酶的作用所致。為此，篩選了酶抑制劑的種類及其用量。得到的最佳處方為：OGP2mg、羥丙基-β-環(huán)糊精(HP-β-CD)200mg、吐溫80300mg、桿菌肽鋅50mg，用鄰苯二甲酸氫鉀緩沖液(pH3)配制成10mL。通過體外孵育試驗和大鼠在體鼻腔循環(huán)灌流吸收試驗

5、，同時測定大鼠血漿OGP水平，進行處方驗證。結(jié)果表明，本給藥系統(tǒng)處方設(shè)計合理、可行，既有利于OGP的鼻粘膜吸收，又能很好地抑制鼻腔酶系統(tǒng)對OGP的降解。 最后，進行了OGP鼻腔給藥系統(tǒng)的Beagle犬藥物動力學(xué)研究。以皮下注射0.025mg·kg-1的OGP生理鹽水溶液為對照，Beagle犬鼻噴給藥0.0875mg·kg-1的OGP鼻腔給藥系統(tǒng)后，采用競爭性酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定Beagle犬血漿中OGP濃度，并用D

6、AS2.0統(tǒng)計分析軟件處理計算統(tǒng)計矩藥動學(xué)參數(shù)。Beagle犬的藥動學(xué)試驗結(jié)果表明，OGP經(jīng)鼻腔給藥和皮下注射后，藥動學(xué)參數(shù)分別為：Tmax(0.80±0.27)/(0.90±0.22)h、Cmax(3.29±1.19)/(2.93±0.66)ng·mL-1、T1/2(3.40±0.55)/(3.30±0.37)h，AUC(0→24h)(26.09±2.45)/(22.98±2.90)ng·h·mL-1、MRT(0→24h)(4.91±