IP-,6-對人結腸癌裸鼠皮下移植瘤生長的干預作用研究.pdf

1、目的：研究肌醇六磷酸（InositolHexaphosphate,IP6）對人結腸癌裸鼠皮下移植瘤生長的影響，并探討相關生物學機制，為IP6的應用提供依據(jù)。
　　 方法：建立人結腸癌裸鼠皮下移植瘤模型，并按移植瘤體積隨機區(qū)組為4組，每組6只。對照組：生理鹽水；5-氟尿嘧啶組（20mg/kg）；IP6干預組：分為低劑量組（40mg/kg）和高劑量組（100mg/kg），各組注射劑量均調(diào)整至0.5ml，每日腹腔注射一次。用藥28d后

2、經(jīng)頸椎脫位處死小鼠。檢測各組裸鼠皮下移植瘤的體積、重量以及裸鼠實驗前后體重的變化，并取移植瘤及肝、腎進行病理學檢測。應用熒光顯微鏡及電鏡觀察各組移植瘤組織及細胞的變化，Hoechst染色及TUNEL法檢測移植瘤內(nèi)細胞凋亡情況，免疫組化、RT-PCR及Western-blot印跡法檢測癌細胞內(nèi)PCNA、P53、bcl-2、及bax表達情況。
　　 結果：24只裸鼠經(jīng)皮下注射一定濃度人結腸癌HT-29細胞后，全部成瘤，成瘤率100％

3、。實驗期間，除5-FU組小鼠狀態(tài)較差，一只出現(xiàn)死亡外，其余各組小鼠狀態(tài)良好，未出現(xiàn)任何不良反應。由裸鼠皮下移植瘤生長曲線可見，與對照組相比，IP6干預組、5-FU組裸鼠皮下移植瘤的生長減慢。對照組、低、高IP6劑量組及5-FU組給藥前后移植瘤體積的變化分別為（0.66±0.15）cm3、（0.45±0.06）cm3、（0.41±0.08）cm3、（0.26±0.54）cm3，IP6干預組與對照組及5-FU組相比，均存在顯著性差異（P<0

4、.05），IP6干預組間無顯著性差異（P>0.05）；對照組、低、高IP6劑量組及5-FU組瘤重分別為（0.80±0.22）g、（0.50±0.10）g（0.46±0.13）g、（0.25±0.92）g，與對照組相比，IP6干預組瘤重降低，差別具有顯著性（P<0.05），與5-FU組比，差別也具有顯著性（P<0.05），IP6干預組間無顯著性差異（P>0.05）。Hoechst染色及TUNEL檢測結果顯示，與對照組相比，IP6干預組癌細

5、胞的凋亡率顯著升高（P<0.05）；免疫組化結果表明，IP6干預組癌細胞內(nèi)PCNA及突變型P53蛋白的表達降低，與對照組相比，差別具有顯著性（P　　 結論：IP6可顯著抑制人結腸癌裸鼠皮下移植瘤的生長，具有明顯的抗癌作用，且IP6發(fā)揮抗癌作用時，副作用小，安全