細(xì)胞電穿孔聯(lián)合低濃度順鉑對(duì)卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生長(zhǎng)作用研究.pdf

1、本文探討細(xì)胞電穿孔(CellElectroporation)聯(lián)合低濃度順鉑對(duì)卵巢癌SKOV3細(xì)胞株體外生長(zhǎng)的影響以及對(duì)人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生長(zhǎng)作用的影響。 方法：1、電穿孔參數(shù)：選用電場(chǎng)600V/cm，電穿孔數(shù)5個(gè)，電容11μF，作用SKOV3細(xì)胞株。根據(jù)作用不同分為電穿孔加藥物組(E+M)；電穿孔組(E)，藥物組(M)和空白組(C)組。觀察各組細(xì)胞處理后生長(zhǎng)變化及流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞凋亡及周期變化； 2、建立人卵巢癌裸

2、鼠皮下移植瘤模型，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)第1部分的四組后按如下處理：(1)E+M組：裸鼠局部腫瘤體內(nèi)注射2μg/ml的順鉑0.2ml，按電穿孔參數(shù)作用；(2)E組：瘤體內(nèi)注射0.2ml0.9％NS后電穿孔作用；(3)M組：瘤體內(nèi)注射2μg/ml順鉑0.2ml；(4)C組：在瘤體內(nèi)注射0.9％NS0.2ml。各組處理時(shí)間為瘤體皮下移植后4周至9周，每6天處理1次，共6次。 實(shí)驗(yàn)中觀察各組裸鼠皮下移植瘤生長(zhǎng)情況，裸鼠體重變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)束72小時(shí)

3、處死裸鼠，用磁酶免法檢測(cè)各組裸鼠血中CA125水平；采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(RT-PCR)，免疫組化法等檢測(cè)各組瘤組織中的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)mRNA，VEGF受體KDR的表達(dá)以及TUNEL測(cè)腫瘤細(xì)胞的凋亡等。 結(jié)果：1、各組細(xì)胞不同方式處理后生長(zhǎng)情況表明E+M組對(duì)SKOV3細(xì)胞的生長(zhǎng)有良好抑制作用；E組對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制大于M組，低于E+M組；M組的低濃度順鉑對(duì)卵巢癌SKOV3細(xì)胞僅有微弱生長(zhǎng)抑制。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析E+M組

4、同其他組比較差異顯著(P＜0.01)。 2、E+M組細(xì)胞凋亡明顯增大(最高達(dá)17.2％，而E組、M組和C組僅為4.8％、4.3％和4.1％)，差異顯著(P＜0.01)。細(xì)胞周期變化中，E+M組的細(xì)胞主要為G2-M期和S期細(xì)胞阻滯。 3、各組實(shí)驗(yàn)結(jié)束后裸鼠體重?zé)o明顯變化。裸鼠皮下移植瘤體積比較，E+M組瘤體明顯縮小，抑瘤率高達(dá)82.21％，較E組、M組和C組差異顯著(P＜0.01)。 4、E+M組腫瘤組織中的VEG

5、FmRNA表達(dá)較E組、M組和C組明顯降低，差異顯著(P＜0.01)。 5、各組裸鼠血中CA125變化情況表明，E+M組CA125均值為7.89±2.13，明顯低于其他三組(P＜0.05)。 6、免疫組化法測(cè)定VEGF受體KDR表達(dá)，E+M組明顯降低，同其他三組的KDR百分值比較差異顯著(P＜0.05)。 7、E+M組腫瘤組織內(nèi)細(xì)胞凋亡指數(shù)，大于E組、M組和C組，差異顯著(P＜0.05)。 結(jié)論：1、電場(chǎng)6