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文檔簡介
1、目的: 本課題以水通道蛋白8(AQP8)為研究內(nèi)容,通過測定腹瀉狀態(tài)下不同時間點結(jié)腸AQP8mRNA表達量的變化,說明AQP8在結(jié)腸水代謝的作用。 方法: 取40只,雌雄不限,體重約20-23g健康昆明小鼠隨機分為4組進行實驗:3組為實驗組,1組為正常對照組(不予以藥物)。3組實驗組分別給予15%甘露醇使小鼠腹瀉,然后以時間長短對腹瀉狀態(tài)下的小鼠進行分組:把第1h時作為第一組、第8h時組作為第二組、第16h時作為
2、第三組,取每只小鼠升、橫、降結(jié)腸的組織,采用免疫組織化學方法和熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(FQ-RT-PCR)方法進行檢測和定量分析研究結(jié)腸粘膜細胞的AQP8mRNA表達量的變化。 結(jié)果: 1免疫組織化學方法發(fā)現(xiàn)正常對照組和腹瀉狀態(tài)下小鼠結(jié)腸上皮細胞包括隱窩細胞胞漿內(nèi)有顯色。 2熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(FQ-RT-PCR)方法發(fā)現(xiàn)正常對照組和腹瀉狀態(tài)下小鼠結(jié)腸粘膜細胞AQP8mRNA均有表達;降結(jié)腸高于升、橫
3、結(jié)腸,但通過析因設(shè)計的方差分析結(jié)腸各部位間AQP8mRNA表達量無統(tǒng)計學意義(P>0.05),還不能認為各部位間AQP8表達有差別。在腹瀉1、8、16h各組中小鼠整段結(jié)腸中AQP8mRNA表達量在1h時稍增加,8h時增加到最高值,16h表達量逐漸減少但仍比正常組高;各組間方差分析P<0.05,8h組AQP8表達量增加與各組相比(P<0.05),其余各組間比較差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 結(jié)論: 1小鼠整個結(jié)腸均有A
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