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1、目的:探討AQP8在正常人絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞和絨癌JAR細(xì)胞株中的表達(dá)差異,及其表達(dá)改變與絨癌發(fā)生的關(guān)系。
方法:正常人絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞(正常組)的原代培養(yǎng)、純化及鑒定;人絨癌JAR細(xì)胞株(絨癌組)的培養(yǎng)。以免疫組織化學(xué)法、免疫熒光激光共聚焦和RT-PCR技術(shù)從蛋白質(zhì)和mRNA水平檢測(cè)AQP8在正常人絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞和絨癌JAR細(xì)胞株細(xì)胞膜上的表達(dá)。
結(jié)果:(1)應(yīng)用免疫組化方法,在正常組中,僅能從顯微鏡中肉眼看到AQP
2、8的極低表達(dá),攝影效果不佳,而在絨癌組中AQP8表達(dá)呈陽性,其陽性細(xì)胞率為93.27%±14.45%,遠(yuǎn)高于正常組。(2)應(yīng)用RT-PCR技術(shù),在正常組與絨癌組中,均檢測(cè)到AQP8 mRNA的表達(dá)。絨癌組AQP8的OD值(0.98±0.35)明顯高于正常組AQP8的OD值(0.32±0.04)(P<0.05)。(3)應(yīng)用免疫熒光染色后行激光共聚焦成像技術(shù)發(fā)現(xiàn),在相同的條件及激發(fā)強(qiáng)度下,可見AQP8在絨癌組呈綠色陽性表達(dá),而在正常組中未見
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