AQP3基因敲除鼠及AQP8基因敲除鼠妊娠相關(guān)表型的研究.pdf

1、廣州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文AQP3基因敲除鼠及AQP8基因敲除鼠妊娠相關(guān)表型的研究姓名：熊正方申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：劉慧姝20090501廣州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文AQP3基因敲除鼠及AQP8基因敲除鼠妊娠相關(guān)表型的研究18天、足月分娩)分為五個(gè)小組，2取孕13天成年健康昆明小鼠的胎盤胎膜組織各3例，運(yùn)用逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)(RT—PCR)技術(shù)檢測(cè)昆明鼠胎盤胎膜組織中水通道蛋白一3mRNA的表達(dá)。3取昆明小鼠和AQP3基因敲

2、除鼠孕13天的胎盤固定于4％多聚甲醛后行HE染色及免疫組化，檢測(cè)胎盤結(jié)構(gòu)形態(tài)變化及AQP3在胎盤胎膜組織中的表達(dá)定位。4分別記錄每小組總胚胎總數(shù)及異常萎縮胚胎數(shù)；記錄各組孕13天，孕16天，孕18天的胎鼠重量，胎盤濕重，胎盤干重，胎盤面積，胎盤含水量以及羊水量，并取孕16的羊水樣本測(cè)量離子成分及滲透壓。5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：?jiǎn)我蛩胤讲罘治黾翱ǚ綑z驗(yàn)用來(lái)做統(tǒng)計(jì)學(xué)檢測(cè)?！窘Y(jié)果】1本研究運(yùn)用RTPCR技術(shù)證實(shí)AQP3mRNA在昆明孕鼠胎盤、胎膜組織均

3、有表達(dá)；運(yùn)用免疫組織化學(xué)技術(shù)對(duì)孕鼠胎盤和胎膜組織中的AQP3表達(dá)以及表達(dá)定位進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)在胎盤樣本中AQP3在胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞有定位表達(dá)，在胎膜中AQP3在羊膜上皮細(xì)胞表達(dá)。2與相同遺傳背景的昆明鼠相比，AQP3基因缺失后妊娠相關(guān)表型變化如下：(1)AQP3敲除鼠受孕率明顯降低，孕早期(孕7天)AQP3基因敲除鼠的孕囊數(shù)目明顯少于昆明鼠(P=O001)。隨著妊娠天數(shù)的延長(zhǎng)，AQP3基因敲除鼠與昆明鼠孕囊數(shù)均有下降，但胚胎丟失率未見明顯差異

4、。(2)AQP3基因敲除鼠胎鼠在妊娠16天、18天及新生鼠的體重較相同孕天昆明鼠明顯降低(P=O000；0000；0000)；(3)孕13天及孕16天AQP3基因敲除鼠的胎盤濕量和胎盤含水量均大于相同孕天昆明鼠的胎盤濕量和胎盤含水量。(4)AQP3基因敲除鼠的羊水量在孕16、18天時(shí)較昆明鼠明顯減少，且孕16天羊水中尿素，Ka，Na水平升高，表現(xiàn)為滲透壓升高。(5)胎盤HE染色：昆明鼠胎盤HE染色三層結(jié)構(gòu)層次清楚，從母體蛻膜側(cè)至胎兒側(cè)依