EEEV-WEEV病毒樣顆粒疫苗和DNA疫苗的構(gòu)建及實(shí)驗(yàn)免疫研究.pdf

1、C l a s s i f i e dI n d e x ：$ 8 5 5C o n f i d e n t i a l ( y e s ／n o ) ·n oC o d e ：1 0 2 2 4N O ．：1 1 0 0 4 1D i s s e r t a t i o nf o rt h eD o c t o r a lD e g r e eC o n s t r u c t i o n a n d I m m u n o

2、 l o g i c a lE x p e r i m e n t S t u d y o f V i r u sl i k eP a r t i c l e sV a c c i n ea n d D N A V a c c i n eo f E E E V ／W E E VC a n d i d a t e ：M a J i n z h u’’ 。X i a X i a n z h u S u p e r v l s o r ：l

3、a n z l a UD e g r e eC a t e g o r y ：D o c t o ro f A g r i c u l t u r eC o l l e g e ：C o l l e g eo f V e t e r i n a r y M e d i c i n eF i r s tl e v e ld i s c i p l i n e ：V e t e r i n a r yS c i e n c eS e c o

4、 n d l e 。v e ld i s c i p l i n e ：P r e v e n t i v eV e t e r i n a r yS c i e n c eH a r b i n C h i n aJ u n e 2 0 1 4東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)博士學(xué)位論文3 ．5 ．1 核酸疫苗存在的優(yōu)點(diǎn)????????????????????????2 33 ．5 ．2 核酸疫苗存在的問(wèn)題??????????????????????

5、??．2 43 ．6 核酸疫苗的展望????????????????????????????2 44 實(shí)驗(yàn)一、E E E V ／W E E V 假病毒中和試驗(yàn)的建立??????????????????．2 64 ．1 材料???????????????????????????????????????????．2 64 ．1 ．1 主要試劑?????????????????????????????2 64 ．1 ．2 細(xì)菌、質(zhì)粒、細(xì)胞??

6、???????????????????????2 64 ．1 ．3 設(shè)備和儀器????????????????????????????2 64 ．2 方法???????????????????????????????????????????．2 74 ．2 ．1 重組質(zhì)粒的構(gòu)建與鑒定????????????????：???????一2 74 ．2 ．2 假病毒的包裝與鑒定????????????????????????2 94 ．2 ．

7、3 假病毒感染滴度的測(cè)定???????????????????????．3 04 ．2 ．4 假病毒感染的抑制實(shí)驗(yàn)???????????????????????．3 04 ．2 ．5 假病毒中和試驗(yàn)的建立???????????????????????．3 04 ．3 結(jié)果???????????????????????????????????????????．3 04 ．3 ．1 目的基因擴(kuò)增結(jié)果?????????????????????

8、????3 04 ．3 ．2 重組質(zhì)粒的鑒定結(jié)果????????????????????????3 24 - 3 ．3 假病毒的獲得與鑒定????????????????????????3 24 ．3 ．4 假病毒感染滴度的測(cè)定???????????????????????．3 34 ．3 ．5 假病毒感染的抑制實(shí)驗(yàn)??????．?????????????????．3 44 ．3 ．6 假病毒中和試驗(yàn)的建立???????????????

9、????????．3 74 ．4 討論????．?．??????????????????????．????：??????????．．．3 74 ．5 小結(jié)??????????????????????????????????????一3 85 實(shí)驗(yàn)二、E E E V 病毒樣顆粒疫苗的構(gòu)建、鑒定與實(shí)驗(yàn)免疫研究???????????3 95 ．1 材料???????????????????????????????????????????．3

10、95 ．1 ．1 菌種、質(zhì)粒和細(xì)胞?????????????????????????．3 95 ．1 ．2 主要試劑?????????????????????????????3 95 ．1 ．3 家蠶細(xì)胞培養(yǎng)基??????????????????????????3 95 ．1 ．4 設(shè)備和儀器????????????????????????????4 05 ．1 ，5 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物?????????????????????????????4

11、 05 ．2 方法???????????????????????????????????????????．4 05 ．2 ．1 重組桿狀病毒基因組的獲得?????????????????????．4 05 ．2 ．2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染與重組桿狀病毒的獲得???????????????????．4 15 ．2 ．3 病毒樣顆粒的表達(dá)與鑒定??????????????????????．4 芝5 ．2 ．4 動(dòng)物免疫?????????????????