參附注射液對(duì)大鼠移植肝臟缺血再灌注損傷保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的：本文旨在從組織和細(xì)胞水平，探討參附注射液(Shenfuinjection，SF)對(duì)大鼠移植肝臟在缺血再灌注損傷(Ischemic reperfusioninjury，IRI)中的保護(hù)作用及其具體機(jī)制。 方法：采用72只健康雄性SD(Sprague Dawley)大鼠，重190～220g，將其隨機(jī)分為對(duì)照組和SF組(SF組受體在供肝植入門(mén)靜脈血流恢復(fù)后即經(jīng)尾靜脈一次性注射SF 1ml/100g，對(duì)照組以相同的方式注射等量的生

2、理鹽水)，每組18對(duì)，采用二袖套法進(jìn)行原位肝移植。其中每組按門(mén)靜脈再灌注時(shí)間不同，又分為三組，分別于肝移植完成2h、4h和6h后收集受體的血清和肝組織，采用ELISA(酶聯(lián)免疫吸附)法測(cè)定血清中腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)的濃度，免疫組織化學(xué)法測(cè)定核因子κB(nuclear factor kappa B，NF-κB)的表達(dá)，原位雜交法測(cè)定細(xì)胞間粘附分子(intercellular adhe

3、sion molecule-1，ICAM-1)mRNA。另選用36只健康雄性SD大鼠，重180～210g，隨機(jī)分為對(duì)照組和SF組(SF組每孔細(xì)胞懸液滴加0.5mlSF，對(duì)照組每孔給予同等量生理鹽水)，其中每組按再氧化時(shí)間不同，又分為三組，分別進(jìn)行原位肝臟灌注，所得細(xì)胞懸液進(jìn)入缺氧-復(fù)氧模型(模擬體外IRI)。分別于復(fù)氧2h、4h和6h后取細(xì)胞懸液進(jìn)行檢測(cè)。采用ELISA法測(cè)定ICAM-l的表達(dá)，免疫細(xì)胞化學(xué)法測(cè)定NF-κB的表達(dá)。

4、 結(jié)果：用于血清和組織學(xué)檢測(cè)的大鼠中，在肝移植完成后2h、4h和6h，SF組TNF-α濃度分別為(576±60pg/ml、518±52pg/ml和421±35pg/ml)，較對(duì)照組的濃度(831±65pg/ml、715±69pg/ml和598±52pg/ml)明顯低(P＜0.05)；同時(shí)，SF組組織的NF-κR和ICAM-lmRNA表達(dá)均明顯弱于對(duì)照組。在復(fù)氧2h、4h和6h后，SF組SEC的ICAM-1濃度分別為(444±3.4 p

5、g/ml、68±3.2 pg/ml和73±4.5pg/ml)，明顯低于對(duì)照組的(59±4.3 pg/ml、98±6.5 pg/ml和111±5.7pg/ml，P＜0.05)；SF組SEC的NF-κB表達(dá)明顯弱于對(duì)照組。 結(jié)論：SF能減輕IRI對(duì)移植肝臟特別是竇狀內(nèi)皮細(xì)胞的損傷，其機(jī)制是通過(guò)抑制肝組織中NF-κB的活化，有效下調(diào)TNF-α的分泌，降低ICAM-1的生成，從而減少白細(xì)胞對(duì)SEC的粘附，顯著改善微循環(huán)。本研究可為提高肝