2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、乳腺癌(breast cancer)是婦女最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,近20年來(lái)發(fā)病率呈明顯上升趨勢(shì),嚴(yán)重危害婦女的身心健康。乳腺癌治療失敗的主要原因是腫瘤的局部浸潤(rùn)和向重要臟器的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,利用分子生物學(xué)手段尋找與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)的因子已成為近年來(lái)醫(yī)學(xué)界研究的熱點(diǎn)。MTA1是近年來(lái)分離出的腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因,已有實(shí)驗(yàn)證明該基因的過(guò)度表達(dá)與多種惡性腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。MMP-9是MMPs(基質(zhì)金屬蛋白酶家族)中的一員, TIMP-1是其特異

2、性抑制物,二者的表達(dá)及代謝失衡與腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移和臨床預(yù)后有密切關(guān)系。 本研究運(yùn)用熒光實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)檢測(cè)了乳腺癌組織和配對(duì)正常乳腺組織中MTAlmRNA的表達(dá),并運(yùn)用免疫組化技術(shù)檢測(cè)了MTA1、MMP-9、TIMP-1蛋白的表達(dá)情況。分析三者與乳腺癌臨床病理指標(biāo)的關(guān)系,并探討三個(gè)指標(biāo)之間的相關(guān)性,旨在尋找可以較準(zhǔn)確預(yù)測(cè)和診斷乳腺癌侵襲和轉(zhuǎn)移的生物學(xué)指標(biāo),為乳腺癌的臨床治療提供更多的實(shí)驗(yàn)證據(jù)。 實(shí)驗(yàn)方法 1.實(shí)

3、驗(yàn)對(duì)象選擇、組織樣本的采集與患者臨床資料的整理選取2005年至2006年在鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院就診的乳腺癌患者作為研究對(duì)象,采集手術(shù)后乳腺癌原發(fā)灶及配對(duì)正常乳腺組織標(biāo)本56對(duì)。搜集患者的性別、年齡、腫瘤大小、病理類(lèi)型等方面的臨床資料,便于統(tǒng)計(jì)分析和研究。 2.采用Trizol試劑提取乳腺癌組織RNA。通過(guò)1.0%的瓊脂糖凝膠電泳及RNA的OD值評(píng)估RNA的含量和純度。 3.使用Promega公司的AMV逆轉(zhuǎn)錄試劑盒進(jìn)行c

4、DNA的逆轉(zhuǎn)錄。PCR擴(kuò)增β-actin檢測(cè)逆轉(zhuǎn)錄效果。 4.設(shè)計(jì)MTAl和β-actin基因引物。 5.對(duì)MTA1基因在乳腺癌原發(fā)灶及配對(duì)正常乳腺組織中表達(dá)量進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)。 6.建立標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行實(shí)驗(yàn)質(zhì)量控制。 7.免疫組化方法檢測(cè)MTA1、MMP-9和TIMP-1三種蛋白的表達(dá)情況。 8.運(yùn)用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件,采用方差分析、卡方檢驗(yàn)和t-檢驗(yàn)等方法對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。按α=0

5、.05水準(zhǔn)雙側(cè)概率確定結(jié)果有無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 1.熒光實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果顯示:83.9%(47/56)的乳腺癌原發(fā)灶標(biāo)本MTA1mRNA的表達(dá)量顯著高于配對(duì)正常乳腺組織(P<0.05)。MTAlmRNA表達(dá)量在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組顯著高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組,臨床分期Ⅲ、Ⅳ期組顯著高于1、Ⅱ期組,組織學(xué)分級(jí)Ⅲ級(jí)組顯著高于Ⅰ、Ⅱ級(jí)組,隨著腫瘤大小的增加,MTA1mRNA的表達(dá)量也呈升高的趨勢(shì)(P<0.05)。免疫組化檢測(cè)MTA1

6、蛋白結(jié)果和PCR結(jié)果吻合,呈現(xiàn)一致的變化趨勢(shì)。 2.乳腺癌中:MMP-9蛋白陽(yáng)性表達(dá)率是73.2%(41/56),顯著高于配對(duì)正常乳腺組織14.3%(8/56)(P<0.05)。MMP-9蛋白表達(dá)率在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組顯著高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組,臨床分期Ⅲ、Ⅳ期組顯著高于Ⅰ、Ⅱ期組(P<0.05)。 3.乳腺癌中TIMP-1蛋白陽(yáng)性表達(dá)率是51.8%(29/56),顯著高于配對(duì)正常乳腺組織10.7(6/56)(P<0.05)。TI

7、MP-1蛋白表達(dá)率在無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組顯著高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組,臨床分期Ⅰ、Ⅱ期組顯著高于Ⅲ、Ⅳ期組(P<0.05)。 4.相關(guān)性分析顯示:MTA1與MMP-9、MMP-9與TMP-1蛋白陽(yáng)性表達(dá)率之間均存在顯著關(guān)聯(lián)性(r=0.363,P<0.01;r=0.323,P<0.05)。 結(jié)論 1.MTA1基因的高表達(dá)可能阻礙乳腺癌細(xì)胞的分化成熟,促進(jìn)腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移。 2.MMP-9蛋白的表達(dá)水平與乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移能力

8、呈正相關(guān)。 3.TMP-1蛋白的表達(dá)水平與乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移能力呈負(fù)相關(guān)。 4.MMP-9與TIMP-1表達(dá)關(guān)系密切,在乳腺癌浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移過(guò)程中起著拮抗作用,MMP-9/TIMP-1的動(dòng)態(tài)表達(dá)平衡在維持細(xì)胞外基質(zhì)完整的過(guò)程中起主要作用。 5.MTA1可能在基因轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)MMP-9的表達(dá),進(jìn)而使MMP-9/TIMP-1表達(dá)失衡,破壞細(xì)胞外基質(zhì)的完整性,從而參與惡性腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程。 6.聯(lián)合檢測(cè)MTA1、MMP-9

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