鱉甲生血丸治療肝纖維化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討鱉甲生血丸對(duì)四氯化碳(CCL<,4>)誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化的防治作用及其機(jī)制，為該藥的臨床應(yīng)用提供依據(jù)。 方法：將大鼠隨機(jī)分為6組，即正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、鱉甲生血丸低劑量(0.7g/kg)、鱉甲生血丸中劑量(1.4g/kg)、鱉甲生血丸高劑量組(2.8g/kg)及肝復(fù)康組(4.2g/kg)，每組12只。除正常對(duì)照組外，其余各組大鼠均首次皮下注射純CCL<,4>5ml/kg，以后皮下注射40％CCL<,4>豆油溶液3m

2、l/kg，2次/周，連續(xù)9周。于實(shí)驗(yàn)第5周開始灌胃給藥，正常對(duì)照組和模型對(duì)照組給予等體積蒸餾水，每天1次，每次1ml/100g連續(xù)給藥5周。各組大鼠均于禁食12小時(shí)后進(jìn)行末次給藥。給藥后2小時(shí)，分別麻醉，頸總動(dòng)脈取血，分離寫血清檢測(cè) ALT、AST、T-BIL、PDGF、TGF-β<,1>、VEGF；取肝組織一塊檢測(cè)Hyp：另取一塊肝組織用10％甲醛固定48h，石蠟包埋，切片，HE染色，鏡下觀察肝細(xì)胞變性、壞死程度，并按下述標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)肝細(xì)

3、胞變性、壞死程度：①“-”：正常肝組織；②“+”：肝細(xì)胞變性范圍不超過肝小葉半徑的1/2，以水變性為主，肝細(xì)胞呈點(diǎn)狀或小灶狀壞死，未見纖維組織的增生，匯管區(qū)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；③“++”：肝細(xì)胞變性范圍超過肝小葉半徑的1/2，以汽球樣變性為主，較多肝細(xì)胞呈碎片狀狀壞死，伴明顯的纖維組織增生，匯管區(qū)大量炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)；④“+++”：肝細(xì)胞大片變性壞死，范圍超過肝小葉半徑的2/3；并以肝細(xì)胞的碎片狀和橋接狀壞死為主，肝實(shí)質(zhì)內(nèi)大量纖維組織增生，向內(nèi)

4、伸展包繞肝小葉，可見中央靜脈偏位或缺如。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用spss10.0 forwidows統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析，病理學(xué)評(píng)分采用Ridit分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。 結(jié)果： 1、鱉甲生血丸對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠一般狀況的影響：在整個(gè)試驗(yàn)期內(nèi)，正常對(duì)照組大鼠活動(dòng)正常，皮毛光滑，飲食、飲水、體重增長(zhǎng)均正常，無一只死亡；模型對(duì)照組大鼠共有5只死亡，進(jìn)食、體重增長(zhǎng)均較正常對(duì)照組大鼠減少；各給藥組大鼠進(jìn)食、體重增長(zhǎng)均較模型對(duì)照組大鼠增加，一般狀況明

5、顯好轉(zhuǎn)。 2、鱉甲生血丸對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠肝功能的影響：模型對(duì)照組大鼠皮下注射CCL<,4>9周后血清ALT、AST、T-BIL水平較正常對(duì)照組大鼠明顯升高(P<0.01)。鱉甲生血丸(0.7g/kg、1.4g/kg、2.8g/kg)組大鼠ALT、AST、T-BIL水平較模型對(duì)照組大鼠均明顯降低(P<0.05或P<0.01)。 3、鱉甲生血丸對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠肝組織Hyp的影響：模型組大鼠皮下注射CCL49周后肝組織Hyp含量明顯較正常

6、對(duì)照組大鼠升高(P<0.01)。鱉甲生血丸(1.4g/kg、2.8g/kg)組肝組織Hyp含量水平明顯較模型組大鼠降低(P<0.01)；鱉甲生血丸(0.7g/kg)組肝組織Hyp含量水平較模型組大鼠有降低趨勢(shì)，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 4、鱉甲生血丸對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠血清PDGF、TGF-β<,1>、VEGF含量的影響：模型對(duì)照組大鼠皮下注射CCL。9周后血清PDGF、TGF-β<,1>、VEGF含量明顯較正常對(duì)照組大鼠升高(P

7、<0.01)。鱉甲生血丸(0.7g/kg、1.4g/kg、2.8g/kg)組血清PDGF、TGF-β<,1>、VEGF含量明顯較模型組大鼠降低(P<0.01)。 5、鱉甲生血丸對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠肝組織病理變化的影響：鏡下可見正常對(duì)照組大鼠肝小葉結(jié)構(gòu)完整清晰；模型對(duì)照組大鼠正常肝小葉結(jié)構(gòu)破壞或消失，肝細(xì)胞索排列紊亂，肝細(xì)胞濁腫、脂肪變性、炎細(xì)胞浸潤(rùn)，部分肝細(xì)胞壞死。與模型對(duì)照組比較，鱉甲生血丸(0.7g/kg、1.4g/kg、2.8g/k