甲狀腺癌特異性高甲基化基因蛋白水平篩查研究.pdf

1、目的：選擇腺癌特異高甲基化候選基因，開展甲狀腺病變組織免疫組化篩查，通過(guò)蛋白表達(dá)分析，尋找甲狀腺癌發(fā)生與蛋白表達(dá)缺失的關(guān)系，為甲狀腺癌的基因甲基化研究提供特異、敏感的指標(biāo)。方法：1）本課題選擇5種文獻(xiàn)報(bào)道確認(rèn)的腺癌異常性甲基化基因（CDH1、MLH1、TIMP3、ESR1和MGMT）；2）應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)腺癌特異高甲基化基因在71例甲狀腺癌、26例甲狀腺腺瘤、15例橋本氏甲狀腺炎、10例結(jié)節(jié)性甲狀腺腫及12例正常甲狀腺組織中的蛋

2、白表達(dá)水平；3）建立一種穩(wěn)定、安全提取石蠟組織中高質(zhì)量DNA的方法，優(yōu)化甲基化PCR的條件。結(jié)果：1）CDH1、MLH1蛋白表達(dá)水平在甲狀腺病變中表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），隨著甲狀腺病變惡性程度升高呈降低趨勢(shì)，同時(shí)CDH1蛋白表達(dá)水平降低與PTC和FTC的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)；2）ESR1、MGMT蛋白表達(dá)水平在甲狀腺病變中有差異，隨著甲狀腺病變惡性程度升高呈上升趨勢(shì)，并與甲狀腺癌組織學(xué)類型相關(guān)，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

3、＜0.05），同時(shí)ESR1蛋白表達(dá)水平升高與甲狀腺癌的臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)；3）TIMP3蛋白表達(dá)水平隨著甲狀腺病變惡性程度升高呈降低趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；4）在甲狀腺癌中，MLH1分別與CDH1、TIMP3蛋白表達(dá)水平，MGMT與ESR1蛋白表達(dá)水平，均呈正相關(guān)（P＜0.05）；5）5例甲狀腺髓樣癌中，CDH1蛋白均表達(dá)，ESR1蛋白表達(dá)缺失，3例甲狀腺低分化癌中，CDH1及ESR1蛋白均表達(dá)，TIMP3蛋白表

4、達(dá)缺失；6）在甲狀腺癌中CDH1、MLH1、TIMP3、ESR1和MGMT蛋白在性別、年齡和民族組中表達(dá)均無(wú)差異。結(jié)論：1）CDH1、MLH1及TIMP3蛋白低表達(dá)可能與甲狀腺癌發(fā)生、轉(zhuǎn)移有關(guān)；2）ESR1蛋白高表達(dá)與甲狀腺癌發(fā)生有關(guān)，并提示預(yù)后良好，阻斷其作用環(huán)節(jié)可能為甲狀腺癌提供新的治療方法；3）MGMT蛋白高表達(dá)現(xiàn)象可能與甲狀腺癌惡性程度有關(guān)，可作為候選臨床分子診斷指標(biāo)；4）在甲狀腺癌中，MLH1與CDH1、TIMP3，MGMT與