原發(fā)性肺腺癌SPG20基因甲基化及Spartin蛋白的研究.pdf

1、肺癌作為呼吸系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，威脅著人類的生存與健康。此類患者中，80％的首診患者已處于晚期，錯過了最佳的手術(shù)治療時機(jī)。盡管各種相應(yīng)的治療手段及設(shè)備不斷更新，但是肺癌患者的5年生存率仍然低于20％，治療效果未能達(dá)到預(yù)期效果。肺癌早期癥狀不明顯，不容易被發(fā)現(xiàn)，而部分肺癌受限于腫物形態(tài)、大小、位置的影響并不能明確診斷，而早期診斷更加困難?，F(xiàn)多項(xiàng)研究顯示DNA啟動子甲基化在肺癌的形成、進(jìn)展過程中發(fā)揮重要作用，如P16、APC、RASSF1

2、A、CDH1、DAPK、CDH13、RARβ-2、MGMT等;并且在肺癌診斷，治療及評價預(yù)后等方面也取得了較好的成績。SPG20基因（痙攣性截癱-20），定位在13q13.3染色體，其編碼Spartin多功能蛋白;Spartin蛋白在細(xì)胞分裂周期的異常作用與腫瘤的發(fā)生具有相關(guān)性;國內(nèi)外研究已經(jīng)證實(shí)SPG20基因甲基化與結(jié)直腸癌及胃癌密切相關(guān)。Spartin蛋白還與表皮生長因子受體(EGFR)的降解有關(guān)，影響該受體的胞吞及運(yùn)輸作用。許多研

3、究、文獻(xiàn)報道EGFR在肺癌高表達(dá)，在正常組織或良性病變中低表達(dá)甚至不表達(dá)。JOANNA等人發(fā)現(xiàn)Spartin蛋白參與了EGFR的內(nèi)化、退化、轉(zhuǎn)運(yùn)與降解，Spartin蛋白的低表達(dá)顯著降低了EGFR的降解。SPG20基因甲基化與肺腺癌的關(guān)系未見明確報道，本實(shí)驗(yàn)主要研究肺腺癌SPG20基因甲基化及Spartin蛋白表達(dá)，并探討二者與臨床特征及EGFR表達(dá)關(guān)系。
　　目的:
　　1、研究SPG20基因甲基化、Spartin蛋白與肺

4、腺癌發(fā)生、發(fā)展及臨床特征之間的關(guān)系。
　　2、研究Spartin蛋白表達(dá)與EGFR之間關(guān)系，SPG20甲基化后Spartin蛋白低表達(dá)可能是肺腺癌中EGFR高表達(dá)機(jī)制之一。
　　方法:
　　1、收取河北醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院胸外科2014年1月至2014年10月期間經(jīng)手術(shù)治療的58例原發(fā)性肺腺癌患者癌標(biāo)本及相應(yīng)遠(yuǎn)癌肺組織（距腫瘤邊緣距離＞5cm，遠(yuǎn)癌肺組織經(jīng)病理科醫(yī)師證實(shí)無癌），其中癌組織作為實(shí)驗(yàn)組，遠(yuǎn)癌肺組織作為實(shí)驗(yàn)對

5、照組。
　　2、應(yīng)用焦磷酸測序方法檢測58例肺腺癌組織及相應(yīng)的遠(yuǎn)癌肺組織SPG20基因甲基化發(fā)生水平。
　　3、通過免疫組織化學(xué)s-p法檢測Spartin蛋白及EGFR在肺腺癌組織及遠(yuǎn)癌肺組織表達(dá)水平。
　　4、統(tǒng)計(jì)臨床資料，收集實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，通過SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　結(jié)果:
　　1、SPG20基因甲基化與肺腺癌的關(guān)系
　　分別對58例實(shí)驗(yàn)組樣本及對照組樣本進(jìn)行SPG20基因甲

6、基化焦磷酸測序定量檢測，根據(jù)對照組樣本數(shù)據(jù)計(jì)算閾值(18.9);實(shí)驗(yàn)組SPG20基因甲基化陽性率為60.3％(35/58)，對照組甲基化陽性率為12.1％(7/58)，實(shí)驗(yàn)組甲基化率顯著高于對照組，有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01);實(shí)驗(yàn)組SPG20甲基化發(fā)生率與TNM病理分期及是否淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，與年齡、性別、吸煙史無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　2、Spartin蛋白表達(dá)與肺腺癌的關(guān)系
　　2.

7、1實(shí)驗(yàn)組Spartin蛋白陽性表達(dá)率44.8％(26/58)低于對照組67.2％(39/58)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）;與TNM病理分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、吸煙史、年齡及性別無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。
　　2.2實(shí)驗(yàn)組SPG20甲基化陽性樣本中Spartin蛋白陽性表達(dá)率34.3％(12/35)，SPG20甲基化陰性表達(dá)樣本中Spartin蛋白陽性表達(dá)率60.9％(14/23)，兩者有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
　　3

8、、EGFR表達(dá)與肺腺癌關(guān)系
　　58例實(shí)驗(yàn)組樣本EGFR陽性表達(dá)率58.6％(34/58)顯著高于對照組3.4％(2/58)，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）;與年齡、吸煙史、性別、TNM病理分期等臨床特征無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）;與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
　　4、SPG20甲基化、Spartin蛋白表達(dá)與EGFR表達(dá)之間關(guān)系
　　4.1實(shí)驗(yàn)組Spartin蛋白表達(dá)陽性樣本中EGFR陽性表達(dá)率為2

9、3.1％(6/26)，而Spartin蛋白陰性表達(dá)樣本中EGFR陽性率為87.5％(28/32)，二者有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01);二者表達(dá)等級之間呈線性關(guān)系（P＜0.01）。
　　4.2實(shí)驗(yàn)組SPG20甲基化陽性表達(dá)組中EGFR陽性率為71.4％(25/35)，SPG20甲基化陰性表達(dá)組中EGFR陽性率為39.1％(9/23)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1、肺腺癌組織中SPG20基因甲基化發(fā)