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1、 目的:通過(guò)比較化療藥物紫杉醇與紫杉醇聯(lián)合MAPKs/ERK信號(hào)傳導(dǎo)通路抑制劑PD98059對(duì)大腸癌細(xì)胞系CX1的殺傷效果,來(lái)驗(yàn)證PD98059是否對(duì)紫杉醇有協(xié)同作用,同時(shí)對(duì)紫杉醇?xì)w外培養(yǎng)大腸癌細(xì)胞的作用作出初步的評(píng)價(jià)。 方法:1、細(xì)胞培養(yǎng):大腸癌細(xì)胞系CX1細(xì)胞(本院腫瘤研究所惠贈(zèng)),生長(zhǎng)于含有56℃、30分鐘滅活后的10﹪的胎牛血清和12U/ml慶大霉素的RPMI1640培養(yǎng)液中,在37℃、5﹪CO2、飽和濕度培養(yǎng)
2、箱內(nèi)傳代培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)采用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞。2、MTT法檢測(cè)藥物敏感性:將CX1細(xì)胞以1×105個(gè)/ml的濃度接種于96孔板,在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4h,待細(xì)胞貼壁后,分成三個(gè)實(shí)驗(yàn)組,一組加入不同濃度的紫杉醇;一組加入PD98059(10nmol/ml)后,加入不同濃度的紫杉醇(1×10-4mol/L~1×10-10mol/L);一組僅加入PD98059(10nmol/ml),同時(shí)以未加藥物刺激的CX1細(xì)胞作為空白對(duì)照組。細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)72h,在培養(yǎng)結(jié)
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