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文檔簡介
1、目的:為證實TRAIL對大腸癌細(xì)胞的作用效果以及探討其可能的作用機(jī)制,該研究從 人胚胎肝組織中克隆了TRAIL的全長cDNA,經(jīng)全自動序列分析儀測序證實其序列后,構(gòu)建了TRAIL的融合蛋白質(zhì)粒及四環(huán)素調(diào)控的真核表達(dá)質(zhì)粒,并將四環(huán)素調(diào)控的真核表達(dá)質(zhì)粒用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染大腸癌細(xì)胞株SW620,用四環(huán)素誘導(dǎo)TRAIL有效表達(dá)后,通過相關(guān)顯微鏡,HE染色及DNA裂解片段等手段分析TRAIL對大腸癌細(xì)胞的凋亡的誘導(dǎo)效應(yīng);并通過蛋白免疫印跡雜交檢測了凋
2、亡細(xì)胞中P53和bcl-2蛋白的表達(dá)水平,以探討TRAIL途徑中有無這兩個蛋白的參與. 第一部分:TRAIL融合蛋白質(zhì)粒及四環(huán)素調(diào)控真核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建;第二部分:TRAIL誘導(dǎo)大腸癌細(xì)胞的凋亡的研究;第三部分:TRID在大腸癌及正常大腸黏膜組織中表達(dá)的研究.結(jié)論:1.首次構(gòu)建了TRAIL的四環(huán)素調(diào)控真核表達(dá)質(zhì)粒;2.證實TRAIL的表達(dá)可受四環(huán)素調(diào)控,且TRAIL能誘導(dǎo)大腸癌細(xì)胞株SW620凋亡;3.從P53和Bcl-2蛋白表達(dá)水平,推
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