多西紫杉醇對人胃癌細(xì)胞的抑制及誘導(dǎo)凋亡作用的研究.pdf

1、目的本課題旨在研究多西紫杉醇對人胃腺癌(MKN-45)細(xì)胞的生長抑制作用及誘導(dǎo)人胃腺癌細(xì)胞凋亡作用,并對其誘導(dǎo)凋亡的機(jī)制作初步的研究.方法常規(guī)培養(yǎng)人胃腺癌MKN-45細(xì)胞株,采用MTT法(四甲基偶氮唑藍(lán)比色法)測定細(xì)胞增殖抑制率;流式細(xì)胞(FCM Flow Cytometry)技術(shù)檢測細(xì)胞周期分布和凋亡率;應(yīng)用電鏡觀察細(xì)胞凋亡的形態(tài)特點(diǎn);采用熒光光度檢測法測定細(xì)胞內(nèi)Caspases(cysteinyl-aspartic-acid-pro

2、teases)酶的活性.結(jié)果1.多西紫杉醇在1.25ug/ml-80ug/ml濃度范圍內(nèi)對MKN-45細(xì)胞株有抑制增殖作用,并且與藥物濃度呈正相關(guān).2.終濃度為20ug/ml的多西紫杉醇作用于MKN-45細(xì)胞3小時和6小時,流式細(xì)胞檢測未見有凋亡峰的出現(xiàn),作用8小時有凋亡峰的出現(xiàn),12小時凋亡率接近50％.3.以20ug/ml的多西紫杉醇誘導(dǎo)MKN-45細(xì)胞凋亡3小時和6小時與未加藥的對照組比較,可見MKN-45細(xì)胞周期被阻滯在G2/M

3、期,S期比例減少.4.多西紫杉醇10ug/ml作用MKN-45細(xì)胞24小時,流式細(xì)胞檢測未見有明顯的凋亡峰的出現(xiàn).5.在凋亡的形態(tài)學(xué)檢測時發(fā)現(xiàn),濃度為20ug/ml的多西紫杉醇作用MKN-45細(xì)胞12小時,可見典型的凋亡形態(tài)學(xué)改變.6.多西紫杉醇濃度在5ug/ml-80ug/ml范圍內(nèi)作用MKN-45細(xì)胞,10小時可誘導(dǎo)Caspases轉(zhuǎn)變?yōu)榛钚誀顟B(tài),且Caspases的活性與干預(yù)的藥物濃度成正相關(guān).結(jié)論新一代的紫杉類抗癌藥物多西紫杉醇