大鼠DRG神經(jīng)元上ASIC電流的分類及其亞基分布特點的研究.pdf

1、目的：
　　 1.驗證在大鼠背根神經(jīng)節(jié)（Dorsal root ganglion，DRG）神經(jīng)元所記錄的天然酸敏感離子通道（ASICs）介導(dǎo)的H+-門控電流的特征及分類；
　　 2.觀察4種ASIC亞基在背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元的表達(dá)與分布，初步探討組織切片上DRG神經(jīng)元免疫細(xì)胞化學(xué)特征與單個急性分離DRG神經(jīng)元電生理特征的相關(guān)性。
　　 方法：
　　 采用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)記錄急性分離的DRG神經(jīng)元ASICs介導(dǎo)

2、的H+-門控電流。應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色ABC法觀察ASIC亞基的表達(dá)與分布特點，利用高清病理圖文分析系統(tǒng)（HPIAS）對染色切片進(jìn)行圖像采集與分析。
　　 結(jié)果：
　　 1.依據(jù)ASICs介導(dǎo)的H+-門控電流的激活及失活動力學(xué)、電流形狀特點、pH依賴性等參數(shù)，重復(fù)記錄到 DRG神經(jīng)元H+-門控電流四種電流類型：1）短暫快速內(nèi)向電流型（Transient inward current，T-型）；2）持續(xù)內(nèi)向電流型（Sust

3、ained inward current，S-型）；3）雙向內(nèi)向電流（Biphasic inward current，B-型）；4）反向電流（Opposite current，O-型）；且所記錄到的四種電流類型的比例如下，S-型（64.5%）＞O-型（20.3%）＞B-型（9%）＞T-型(3.8%)。
　　 2.DRG組織切片相同視野下每張切片ASIC亞基免疫反應(yīng)陽性的神經(jīng)元數(shù)目分別為：
　　 ASIC1是42.00±6

4、.92，ASIC2是55.25±13.12，ASIC3是79.50±23.83，ASIC4是61.00±25.97.按從多到少依次排序為：ASIC3>ASIC4＞ASIC2＞ASIC1。ASIC1和ASIC3的陽性神經(jīng)元數(shù)目在統(tǒng)計學(xué)上存在極顯著性差異（P<0.01）,而ASIC2和ASIC3的陽性神經(jīng)元數(shù)目之間存在顯著性差異（P<0.05）。
　　 3.免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示：ASIC1、ASIC3免疫陽性的DRG神經(jīng)元主要集中在

5、中等（20μm35μm）的DRG神經(jīng)元較少，中小直徑與大直徑的陽性神經(jīng)元的數(shù)目進(jìn)行比較，在統(tǒng)計學(xué)上具有顯著性差異（p<0.05），但ASIC3的表達(dá)多于ASIC1；ASIC2免疫陽性DRG神經(jīng)元以中、大直徑者為多，且中等直徑DRG上表達(dá)ASIC2亞基的神經(jīng)元個數(shù)和小直徑與大直徑DRG上的有顯著性差異（p<0.05）；ASIC4免疫陽性DRG神經(jīng)元中等直徑者顯著多于大、小直徑的