流行性乙型腦炎患兒血及腦脊液中神經(jīng)肽Y、IL-8變化的研究.pdf

1、目的：流行性乙型腦炎即乙腦(encephalitisB，EpidemictypeBencephalitis，ETBE)是以中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害為主的急性傳染病，也是一種人畜共患的自然疫源性疾病，以2～7歲兒童發(fā)病率最高，有很高的病死率、病殘率。目前臨床上尚無特效的治療藥物。因此，尋求與乙腦病情及預后密切相關的指標以指導臨床治療就顯得尤為重要。白細胞介素-8(interleukin-8，IL-8)是一種中性粒細胞、T淋巴細胞以及嗜堿性粒細胞的

2、趨化因子，是中性粒細胞激活和遷移的重要調節(jié)因子和進入損傷組織的重要介質，在損傷病理中起重要作用。研究表明，腦損傷時腦脊液中IL-8的濃度比外周血漿高，說明此時受損腦組織是IL-8的主要來源。神經(jīng)肽Y(NeuropeptideY,NPY)又稱神經(jīng)肽酪氨酸，是由36個氨基酸殘基組成的活性多肽，廣泛分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，它在神經(jīng)細胞內合成后被輸送至神經(jīng)末梢作為一種神經(jīng)遞質與經(jīng)典神經(jīng)遞質共存，與學習記憶、運動行為、晝夜節(jié)律、攝食和飲水、內分泌等多

3、項功能有關。多項研究發(fā)現(xiàn)，該物質與腦卒中、癲癇、腦外傷等中樞神經(jīng)損傷有密切關系。本研究通過測定流行性乙型腦炎患兒血及腦脊液中極期和恢復期神經(jīng)肽Y、白細胞介素-8的水平，觀察NPY和IL-8在流行性乙型腦炎中的變化，研究該變化與病情及預后的關系，探討其在流行性乙型腦炎發(fā)病中的作用，從而為尋找有效的臨床診治方案提供理論依據(jù)。 方法：研究對象分兩組，觀察組為43例乙型腦炎患兒，并按病情輕重分為普通型(22例)和重型(21例)，對照組血

4、清取自25例與觀察組年齡、性別無差異(P＞0.05)的健康查體兒童，對照組血漿取自26例與觀察組年齡、性別無差異(P＞0.05)的健康查體兒童，對照組腦脊液取自非感染性疾病、非神經(jīng)系統(tǒng)疾病、非腫瘤、非自身免疫性疾病、非心臟手術的與觀察組年齡、性別無差異的15例手術兒童。觀察組分別于極期和恢復期常規(guī)采集靜脈血4ml，分兩份分別注入含10％EDTA二鈉30μl以及抑肽酶40μl的試管和血常規(guī)采血管中，4℃3000rpm離心10分鐘，分別分離

5、血漿和血清，Ep管中保存待測。并同時收集極期腦脊液2ml，注于Ep管中保存待測。對照組每例采靜脈血1次4ml，分別分離血清血漿。作為極期及恢復期之對照。對照組腦脊液取自符合上述條件的手術兒童，僅取1次，約2ml置于Ep管。所有標本置于-70℃冰箱凍存，一次性檢測。用IgM抗體捕獲酶聯(lián)免疫法檢測觀察組和對照組血清特異性IgM抗體；用放射免疫測定法(radioimmunoassay,RIA)檢測觀察組和對照組血清及腦脊液IL-8、NPY水平

6、。NPY測定采用非平衡法，按說明書依次加緩沖液、標準品、樣品、抗血清搖勻置4℃48h后加125I-NPY搖勻置4℃24h再加PR試劑混勻，室溫放置20min，4℃3500rpm離心25min，吸棄上清液，在γ計數(shù)器上測定cpm數(shù)。以B/T計算NBS、S0結合百分率，以B/B0計算標準及待測樣品結合百分率，繪制標準曲線查出樣品值或由自動γ計數(shù)器直接給出有關參數(shù)、標準曲線及樣品濃度。IL-8采用非平衡法，各試管按說明書依次加緩沖液、標準品、

7、標本、125I-IL-8、IL-8抗血清，混勻4℃溫育24h，加免疫分離劑混勻于室溫放置20min，然后4℃3500rpm離心25min棄上清液測出cpm繪制標準曲線，查出樣品值。所有實驗數(shù)據(jù)采用SPSS13.0ForWindows軟件包進行統(tǒng)計，實驗結果以(-x)±s表示，各組均數(shù)用單因素方差分析，相關分析用直線相關與回歸，動態(tài)分析用兩樣本配對t檢驗，P＜0.05認為有統(tǒng)計學意義。 結果：①.特異性IgM抗體檢測結果：觀察組血

8、清抗乙型腦炎病毒特異性IgM抗體陽性率達100％，對照組陽性率為0％。②.NPY水平：極期普通型及重型血漿NPY水平明顯高于對照組(普通型與對照組相比P=0.047＜0.05，重型與對照組相比P=0.000＜0.01)，腦脊液NPY水平明顯高于對照組(普通型與對照組相比P=0.000＜0.01，重型與對照組相比P=0.000＜0.01)，且重型觀察組血漿及腦脊液NPY水平均明顯高于普通型(血漿中P=0.035＜0.05，腦脊液中P=0.

9、022＜0.05)；恢復期觀察組普通型、重型與對照組血漿中NPY水平兩兩比較均無顯著性差異(普通型與重型比較P=0.101＞0.05，普通型與對照組比較P=0.114＞0.05，重型與對照組比較P=0.884＞0.05)，腦脊液中NPY水平觀察組仍高于對照組(P=0.000＜0.01)，重型與普通型比較無差異(P=0.096＞0.05)；恢復期普通型、重型NPY水平較極期均明顯降低(血漿普通型P=0.000＜0.01，重型P=0.003

10、＜0.01；腦脊液普通型P=0.023＜0.05，重型P=0.000＜0.01)；觀察組極期血漿與腦脊液中NPY水平變化呈正相關(r=0.600,P=0.000＜0.05)。③.IL-8水平：極期血清、腦脊液IL-8水平明顯高于對照組(血清中普通型與對照組相比P=0.000＜0.01，重型與對照組相比P=0.000＜0.01；腦脊液中普通型與對照組相比P=0.000＜0.01，重型與對照組相比P=0.000＜0.01)，且重型觀察組血清

11、及腦脊液IL-8水平均明顯高于普通型(血清中重型與普通型相比P=0.033＜0.05，腦脊液中重型與普通型相比P=0.003＜0.05)，恢復期普通型及重型無論血清還是腦脊液IL-8水平較極期均明顯降低(血清中P=0.000＜0.01，腦脊液中P=0.000＜0.01)，恢復期普通型和重型及對照組血清IL-8水平比較無顯著性差異(普通型與重型P=0.656＞0.05,普通型與對照組P=0.068＞0.05)，但重型仍高于對照組(P=0.

12、025＜0.05)，普通型與重型腦脊液中IL-8水平比較無顯著性差異(P=0.609＞0.05)，但仍高于對照組(P=0.000＜0.01)；觀察組極期血清及腦脊液中IL-8水平變化呈正相關(r=0.328，P=0.032＜0.05)。④.極期血清及腦脊液中NPY與IL-8水平之間無相關性(腦脊液r=0.066，P=0.672＞0.05，血中r=-0.067，P=0.670＜0.01)。 結論：①.血清與腦脊液中NPY、IL-8