染料介導(dǎo)光氧化處理的同種異體血管移植物生物學(xué)性能研究.pdf

1、目的：針對小血管移植研究領(lǐng)域，因血管替代材料選擇和處理方法的不同導(dǎo)致移植物的生物學(xué)性能具有顯著差異這一先期研究結(jié)論，進(jìn)一步探討目前具有良好應(yīng)用前景的染料介導(dǎo)光氧化(dye-mediatedphotooXidation，DMP)法，用于同種異體小血管移植的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。通過觀察經(jīng)DMP法處理的新西蘭兔胸主動(dòng)脈的血管評(píng)價(jià)指標(biāo)變化，明確移植血管的生物相容性，和在體內(nèi)血流條件下移植血管的細(xì)胞毒性、生物穩(wěn)定性以及抗鈣化性能。 方法：采用DMP

2、法處理的新西蘭兔胸主動(dòng)脈作為研究對象，以0.2﹪戊二醛(glutaraldehyde，GA)處理的新西蘭兔胸主動(dòng)脈以及自體動(dòng)脈原位移植作為兩個(gè)對照組，通過體外溶血試驗(yàn)觀察處理后動(dòng)脈的生物相容性；建立新西蘭兔腹主動(dòng)脈移植模型；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物觀察飼養(yǎng)1個(gè)月后，取出移植血管，通過掃描電鏡半定量計(jì)數(shù)觀察移植血管內(nèi)皮細(xì)胞覆蓋情況，以此評(píng)測移植血管的生物毒性；通過光學(xué)顯微鏡半定量計(jì)數(shù)觀察移植血管的體內(nèi)生物穩(wěn)定性；通過原子吸收光譜法測定移植血管的組織鈣含量

3、，以此評(píng)價(jià)移植血管的體內(nèi)抗鈣化性能。 結(jié)果：(1)新西蘭兔腹主動(dòng)脈移植模型圍手術(shù)期死亡率14.3﹪。 (2)生物相容性試驗(yàn)。DMP組溶血指數(shù)0.69﹪，GA組溶血指數(shù)3.76﹪，均低于美國《ASTM協(xié)會(huì)醫(yī)用裝置標(biāo)準(zhǔn)》及國家標(biāo)準(zhǔn)(5﹪)，DMP組比GA組吸光光度值明顯減少(P<0.01)。 (3)細(xì)胞毒性試驗(yàn)。掃描電鏡下半定量觀測內(nèi)皮細(xì)胞覆蓋率：DMP組內(nèi)皮細(xì)胞覆蓋率86.2±3.3﹪，GA組內(nèi)皮細(xì)胞覆蓋率47.2

4、±4.2﹪，DMP組內(nèi)皮細(xì)胞覆蓋率較GA組高，差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 (4)生物穩(wěn)定性試驗(yàn)。光學(xué)顯微鏡半定量計(jì)數(shù)生物穩(wěn)定性指數(shù)：DMP組生物穩(wěn)定性指數(shù)91.3±3，GA組生物穩(wěn)定性指數(shù)79.7±5.7，自體動(dòng)脈移植組生物穩(wěn)定性指數(shù)92.9±4.3，DMP組生物穩(wěn)定性指數(shù)較自體動(dòng)脈移植組低，差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，DMP組生物穩(wěn)定性指數(shù)較GA組高，差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 (5)抗鈣化性能

5、試驗(yàn)。原子吸收光譜法定量檢測組織鈣含量：DMP組組織鈣含量3.58±0.22 μ g/mg，GA組組織鈣含量22.5±0.53 μ g/mg，自體動(dòng)脈移植組組織鈣含量2.99±0.33 μ g/mg，DMP組組織鈣含量較自體動(dòng)脈移植組高，差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，DMP組組織鈣含量較GA組低，差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 結(jié)論：(1)新西蘭兔腹主動(dòng)脈移植動(dòng)物模型適合用于評(píng)價(jià)血管替代材料的體內(nèi)血流動(dòng)力學(xué)條件下的變化

6、。 (2)應(yīng)用GA、DMP法處理的血管材料溶血試驗(yàn)指數(shù)均低于國際和國內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)，適合人體植入。DMP法處理的血管材料溶血試驗(yàn)指數(shù)較GA低。 (3)應(yīng)用DMP法處理的血管材料細(xì)胞毒性較GA低，適合內(nèi)皮細(xì)胞黏附生長。 (4)應(yīng)用DMP法處理的血管材料體內(nèi)生物穩(wěn)定性接近自體動(dòng)脈，較GA處理的血管材料生物穩(wěn)定性高。 (5)應(yīng)用DMP法處理的血管材料體內(nèi)抗鈣化性能接近自體動(dòng)脈，明顯優(yōu)于GA處理的血管材料。 (6