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文檔簡介
1、背景:宮內(nèi)節(jié)育器(IUD)作為一種安全、有效、長效、可逆的避孕措施在我國得到廣泛使用,但其引起子宮異常出血的副作用至今仍未妥善解決,成為影響其續(xù)用率的主要原因.置器后異常出血主要表現(xiàn)為月經(jīng)量過多、經(jīng)期延長及點滴出血等.國內(nèi)外研究表明IUD引起的子宮異常出血由多種因素所致,其中包括子宮內(nèi)膜前列腺素合成異常、纖溶活性增加、局部炎癥反應增加等,但這不能圓滿解釋抗前列腺素、抗纖溶及抗炎藥物并非對所有病例都有效.子宮內(nèi)膜存在周期性生長和脫落,同時
2、伴隨由多種血管生長因子調(diào)節(jié)的周期性血管生長.往有研究顯示放置IUD有異常出血者子宮內(nèi)膜血管結(jié)構(gòu)異常,表現(xiàn)為表淺螺旋動脈擴張伴螺旋動脈管壁和內(nèi)皮細胞變性、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)表達增加及微血管密度增加等.由此我們推測IUD引起的子宮不規(guī)則出血可能與各種生長因子表達異常引起的血管結(jié)構(gòu)和功能失常有關. 促血管生成素(angiopoietin,Ang)是近年來發(fā)現(xiàn)的血管生長因子,在人主要存在Ang-1和Ang-2兩種亞型,二者均參
3、與調(diào)節(jié)血管生成和炎癥中的血管穩(wěn)定,在胚胎及成人生理和病理性血管生成中發(fā)揮重要作用.Ang-1通過與內(nèi)皮細胞特異性酪氨酸酶受體(15e-2)結(jié)合而誘導后者自身磷酸化,隨后促進新生血管周圍支持細胞的聚集,降低血管通透性,從而促使新生血管穩(wěn)定性增加.此外,Ang.1還有促進炎癥中的血管穩(wěn)定及抑制內(nèi)皮細胞凋亡的作用.Ang-2競爭性地與Tie-2結(jié)合但不引起其磷酸化,從而阻斷Ang-1的作用,使血管周圍基質(zhì)細胞降解,穩(wěn)定性下降,在VEGF等存在
4、時促進新生血管出芽,反之則導致血管退化.Ang-2還參與炎癥反應的誘導.Ang-1和Ang-2在人子宮內(nèi)膜均有表達.Ang-1的表達呈孕激素依賴性,在分泌期子宮內(nèi)膜表達增加.月經(jīng)過多者子宮內(nèi)膜Ang-1表達下降.Ang-2的表達隨月經(jīng)周期變化不明顯,但體外實驗中缺氧、炎性因子等能上調(diào)Ang-2在人子宮內(nèi)膜內(nèi)皮細胞的表達.這說明Ang-1和Ang-2可能參與了生理和病理性的子宮內(nèi)膜血管生成. 本研究收集放置IUD后有異常出血者為研
5、究對象并檢測子宮內(nèi)膜Ang-1、Ang-2、Tie-2在mRNA水平及Ang-1、Ang-2在蛋白水平的表達變化,旨在從血管生成方面探討IUD出血副反應的發(fā)生機制,為治療放置宮內(nèi)節(jié)育器后異常出血提供新思路. 材料與方法: 資料來源:2006.3~2007.3在浙江大學醫(yī)學院附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院門診就診婦女,病例組滿足下列條件:①年齡在25~45歲;②連續(xù)3個月未用過甾體激素類藥物;③放置IUD前月經(jīng)規(guī)律,經(jīng)量正常,放置后經(jīng)量明
6、顯增加或經(jīng)期延長(>Sd):④B超排除子宮肌瘤、子宮腺肌癥、子宮內(nèi)膜息肉等引起的月經(jīng)過多;⑤放置年限0.5~10年;⑥無肝病、血液系統(tǒng)疾病史;⑦排除放置左炔諾孕酮宮內(nèi)緩釋系統(tǒng)和含消炎痛IUD.病例組共33例,其中增生期23例,分泌期10例.對照組為正常子宮內(nèi)膜28例,其中增生期12例,分泌期16例.各組在年齡、取內(nèi)膜時間等方面具有可比性.所取組織分為兩份,一份放入液氮中速凍,另一份放入10﹪中性甲醛固定.應用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(RT-
7、PCR)檢測Ang-1、Ang-2及Tie-2 mRNA表達,并用免疫組化檢測Ang-1和Ang-2蛋白質(zhì)的表達.利用H-Score法對Ang-1和Ang-2的染色進行半定量.對Ang-1、Ang-2、Tie-2 mRNA相對光密度和Ang-1和Ang-2 H-Score積分行獨立樣本t檢驗及非參數(shù)檢驗. 結(jié)果: 1、各組Ang-1、Ang-2及Tie-2 mRNA的表達改變在人子宮內(nèi)膜可檢測到Ang-1、Ang-2和T
8、ie-2 mRNA的表達.置IUD組子宮內(nèi)膜增生期和分泌期Ang-1表達均下降(p<0.05).置IUD組分泌期Tie-2的表達以及Ang-1/Ang-2比例較正常分泌期也有明顯下降(p<0.05). 2、Ang-1在子宮內(nèi)膜的表達Ang-1主要表達于子宮內(nèi)膜腺上皮、腔上皮及血管內(nèi)皮細胞,在基質(zhì)細胞表達較弱.分泌期子宮內(nèi)膜Ang.1表達增加,在螺旋動脈周圍蛻膜化的基質(zhì)細胞尤其增強.放置IUD有出血者可見部分螺旋動脈擴張和血管內(nèi)皮
9、細胞缺如.Ang-1在各組H-Score積分提示,正常子宮內(nèi)膜分泌期Ang-1表達增加(p<0.001).置IUD組增生期子宮內(nèi)膜Ang-1在腺體和間質(zhì)表達及二者加和均下降(p<0.001):置IUD組分泌期子宮內(nèi)膜Ang-1表達在腺體下降(p<0.01). 3、Ang-2在子宮內(nèi)膜的表達Ang-2主要表達于子宮內(nèi)膜腺上皮、腔上皮和血管內(nèi)皮細胞,在基質(zhì)細胞表達較Ang-1更弱.Ang-2表達在正常分泌期子宮內(nèi)膜腺體比增生期降低(
10、p<0.05).Ang-2在置IUD組分泌期腺體比正常分泌期增加(p<0.05). 結(jié)論: 1.Ang-1蛋白及Tie-2 mRNA在正常子宮內(nèi)膜分泌期比增生期表達增加,Ang-2蛋白在正常分泌期比增生期表達下降,這可能促進了分泌期血管的穩(wěn)定. 2.放置IUD有異常出血者子宮內(nèi)膜Ang-1 mRNA和蛋白、Tie-2 mRNA表達下降,伴有.Ang-2蛋白表達增加,這可能通過影響血管功能而參與了IUD的出血副反應
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