咪喹莫特作為佐劑的透皮免疫效果研究.pdf

1、皮膚是人體的最大的組織和器官，它的表面積接近2m<'2>。皮膚也是一個(gè)具有獨(dú)特免疫功能并與全身免疫系統(tǒng)密切相關(guān)的組織器官。 德國(guó)的醫(yī)學(xué)學(xué)生Iangerhans P于1868年首次發(fā)現(xiàn)并描述了皮膚中的抗原遞呈細(xì)胞，后被命名為朗格漢斯細(xì)胞(Iangerhans cell，LC)。未成熟的朗格漢斯細(xì)胞具有較強(qiáng)吞噬處理抗原能力，并沿淋巴管遷移至近側(cè)引流淋巴結(jié)(draininglymph nodes，DLN)的T細(xì)胞區(qū)并分化成熟而具有很強(qiáng)

2、的抗原遞呈(包括交叉遞呈)能力。 透皮免疫(Transcutaneous immunization，TCl)是一種新的疫苗接種方法。它通過(guò)在皮膚表面局部應(yīng)用免疫佐劑和疫苗抗原來(lái)使機(jī)體產(chǎn)生全身性免疫反應(yīng)。通過(guò)透皮劑等技術(shù)手段，使疫苗抗原進(jìn)入表皮中并被表皮朗格漢斯細(xì)胞吞噬，在佐劑的作用下，迅速引發(fā)全身性的免疫反應(yīng)，從而達(dá)到免疫效果。 2004年Karande等發(fā)現(xiàn)了透皮劑聚氧乙烯十二烷基醚硫酸鈉(sodium laureth

3、sulfate，SLA)+苯基哌嗪(phenyl piperazine，PP)的組合，該組合能夠有效促進(jìn)分子量小于1～10kD的生物大分子的透皮，并不誘導(dǎo)皮膚損傷。SLA+PP的組合能夠在離體的皮膚中最大限度的促進(jìn)肝素、促黃體(生成)激素．釋放激素等生物大分子的透皮；在小鼠皮膚上的實(shí)驗(yàn)也證實(shí)醋酸亮丙瑞林能夠在促透劑的作用下進(jìn)入小鼠體內(nèi)。 在研究人類單純皰疹病毒的治療時(shí)發(fā)現(xiàn)imiquimod具有很強(qiáng)的抗病毒和抗腫瘤活性，美國(guó)3M公

4、司在1997年將其上市，制成5％的外用軟膏劑(商品名Aldara)。咪喹莫特可以刺激單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞產(chǎn)生以干擾素IFN-α、腫瘤壞死因子TNF-α、白介素IL-1、6、8、10、12為代表的多種細(xì)胞因子。我們用咪喹莫特免疫刺激特性作為透皮佐劑，研究亞單位疫苗、病毒疫苗、DNA疫苗三種疫苗的透皮免疫效果。 聚氧乙烯十二烷基醚硫酸鈉和苯基哌嗪混合之后溶于等體積PBS緩沖液和無(wú)水乙醇混合液中，制成透皮劑。將其分別與HBV

5、亞單位抗原、HBsAg DNA疫苗、滅活的HAV抗原混合后，涂抹于小鼠脫毛的背部皮膚表面，同時(shí)涂抹咪喹莫特作為佐劑，分別在2、4、6、8、12、20周用ELISA法檢測(cè)血清中的抗體水平。在透皮免疫2周后即可在用咪喹莫特作為佐劑的HBV亞單位抗原組和DNA疫苗組中用EL,ISA法檢測(cè)到血清中的抗體，平均分別為1:19.1和1:30.3；抗體滴度在8周達(dá)到最高水平，平均分別為1:105.6和1:105.6；無(wú)佐劑組在4周才檢測(cè)到抗體，抗體滴