芥菜籽抑制咪喹莫特誘導(dǎo)BALB-c小鼠銀屑病樣炎癥的研究.pdf

1、研究背景及目的:
　　近年來(lái)發(fā)現(xiàn)先天免疫在銀屑病的發(fā)病中起重要作用,其中pDC的作用得到越來(lái)越多關(guān)注。pDC是I型干擾素(IFN-α/β)的主要來(lái)源。咪喹莫特是TLR7/8的特異性激活劑,與pDC內(nèi)涵體膜上TLR7特異結(jié)合導(dǎo)致IFN-α的大量分泌。研究發(fā)現(xiàn)外用咪喹莫特于BALB/c小鼠可以誘導(dǎo)出銀屑病樣炎癥,其作用機(jī)理主要是依賴于IFN-α、IL-23/IL-17軸和IL-22,并且認(rèn)為這是在自然免疫狀態(tài)下誘導(dǎo)的理想的銀屑病小鼠模

2、型。目前銀屑病的治療主要是對(duì)癥治療,這些治療療程長(zhǎng),不良反應(yīng)多,患者依從性差。因此有必要進(jìn)一步探討患者更容易接受的防治方法。芥菜籽是一種十字花科蕓苔屬植物的種子。研究發(fā)現(xiàn)芥菜籽具有抗炎、抗癌、抗菌等多種生理功能。其作用機(jī)理包括抗氧化和清除自由基。我們最近研究證明芥菜籽還具有抗變應(yīng)性接觸性皮炎的作用,但是迄今還未見(jiàn)芥菜籽對(duì)銀屑病治療作用的研究報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)芥菜籽對(duì)咪喹莫特誘導(dǎo)小鼠銀屑病樣炎癥的作用,初步探討其應(yīng)用于防治干預(yù)銀屑病的可能性

3、。
　　方法:
　　1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn):建立咪喹莫特誘導(dǎo)銀屑病樣炎癥模型;觀察芥菜籽對(duì)咪喹莫特誘導(dǎo)銀屑病樣炎癥的影響,以及腹腔注射NF-κB抑制劑對(duì)炎癥的影響;
　　2.HE染色研究皮損組織病理改變;
　　3.免疫組化法研究皮損T細(xì)胞、pDC及巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)分布及皮損iNOS的表達(dá);流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定脾臟分離T細(xì)胞、pDC及巨噬細(xì)胞的構(gòu)成比變化;
　　4.分光光度法檢測(cè)外周血漿氧化應(yīng)激指標(biāo)SOD、CAT、GSH-PX

4、和MDA
　　5.RT-PCR法檢測(cè)皮損中IFN-α、IL-17A/F和IL-22mRNA的表達(dá),及ELISA法檢測(cè)血清IFN-α、IL-17和IL-22的水平。
　　結(jié)果:
　　1.芥菜籽顯著抑制小鼠銀屑病樣炎癥,校正PASI評(píng)分比模型組小鼠明顯減低,p<0.05,但是不能完全抑制炎癥的出現(xiàn);
　　2.芥菜籽能減少銀屑病樣炎癥中T細(xì)胞、pDC和巨噬細(xì)胞等細(xì)胞的浸潤(rùn)以及減輕咪喹莫特誘導(dǎo)小鼠脾臟腫大,改變脾臟中CD

5、4+、CD8+T細(xì)胞、pDC和巨噬細(xì)胞的百分比構(gòu)成;
　　3.相比正常對(duì)照組,模型組小鼠皮損中抗氧化酶活性SOD、CAT和GSH-PX顯著降低以及反應(yīng)脂質(zhì)過(guò)氧化的指標(biāo)MDA含量顯著增高,皮損iNOS的表達(dá)增強(qiáng);芥菜籽顯著升高SOD、CAT和GSH-PX的活性,降低MDA含量及皮損iNOS表達(dá);
　　4.相比模型組小鼠,芥菜籽組小鼠皮損中IFN-α、IL-17A/F和IL-22的mRNA相對(duì)量及血清IFN-α、IL-17和IL

6、-22水平顯著降低,動(dòng)態(tài)分析中發(fā)現(xiàn)從外用咪喹莫特第2-4天起就有顯著差異,p<0.05;
　　5.芥菜籽能抑制銀屑病樣炎癥皮損中NF-κB的表達(dá);腹腔注射PDTC可以減輕銀屑病樣皮炎,并且血漿SOD、CAT和GSH-PX活性及MDA含量、皮損IFN-α、IL-17A/F和IL-22的mRNA相對(duì)量與芥菜籽組小鼠無(wú)顯著差別,p>0.05;mRNAs的含量高于對(duì)照組小鼠,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,p<0.01。
　　結(jié)論:
　　芥