新型疫苗鋅佐劑的制法優(yōu)化及ATP與鋁、鋅復(fù)合佐劑免疫增強效果研究.pdf_第1頁
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1、碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼:學(xué)號:10023S2009475新型疫苗鋅佐劑的制法優(yōu)化及ATP與鋁、鋅復(fù)合佐劑免疫增強效果研究Preparationofnewvaccinesadjuvantzinchydroxideandtheimmune—enhancingeffectoftheATPaluminum,theATPzinccompoundadjuvant所院:醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所姓名:張浩指導(dǎo)教師:胡凝珠主任技師導(dǎo)師小組:胡云章研究員學(xué)科專業(yè):生

2、物化學(xué)與分子生物學(xué)研究方向:新型疫苗與疫苗佐劑完成日期:二O一二年三月中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文摘要疫苗佐劑的發(fā)展直接影響到新型疫苗的開發(fā)及應(yīng)用,為了開發(fā)出更安全、高效、經(jīng)濟以及更具有靶向性的佐劑,國內(nèi)外研究人員進行了大量的研究。目前,鋁佐劑仍然是唯一在世界范圍內(nèi)被批準用于人用疫苗的佐劑,它主要依賴儲存庫效應(yīng)和免疫刺激效應(yīng)的作用機制,能夠顯著提高疫苗在體內(nèi)的效果,經(jīng)過了幾十年的應(yīng)用,雖然出現(xiàn)部分輕微過敏反應(yīng),但總體來說其安

3、全性和有效性均得到了證實。鋅是人體必需微量元素之一,人體生長發(fā)育離不開鋅,體內(nèi)鋅水平的高低會對神經(jīng)、生殖和免疫系統(tǒng)產(chǎn)生影響。利用鋅與機體免疫系統(tǒng)之間的復(fù)雜關(guān)系,鋅療法被越來越廣泛地應(yīng)用于一些疾病的治療中。氫氧化鋅與氫氧化鋁理化性質(zhì)相近,在一定條件下,二者均能以穩(wěn)定的膠體溶液形式存在,由于鋁佐劑在臨床應(yīng)用中取得了良好的效果,因此將氫氧化鋅作為疫苗佐劑進行的研究也非常具有潛力,在前期研究中,也初步證實了氫氧化鋅佐劑的安全性和有效性。在本研究

4、中,參照鋁佐劑的制備方法,首先將可溶性鋅鹽葡萄糖酸鋅作為研究對象,利用其與低濃度氫氧化鈉溶液發(fā)生反應(yīng),制備出性質(zhì)穩(wěn)定質(zhì)地均勻的氫氧化鋅膠體溶液,之后再針對疫苗佐劑的要求對其理化性質(zhì)進行改進,最終制得可以作為疫苗佐劑使用的氫氧化鋅膠體溶液。三磷酸腺苷二鈉(ATP)是一種輔酶,有改善機體代謝的作用,同時又是體內(nèi)能量的主要來源。ATP能在某些免疫反應(yīng)中扮演重要角色,實驗表明,ATP在與MgCl2復(fù)合使用后,可以對體內(nèi)IgG、IgA、IgM表達

5、水平產(chǎn)生一定的影響,同時,ATP是體內(nèi)一類重要的內(nèi)源性危險信號因子,在缺氧、組織損傷、病變發(fā)生時,多會伴隨周圍組織體液中ATP水平的變化,利用這一特點,改變體內(nèi)ATP的水平在一定條件下也能有效激活免疫系統(tǒng),并影響其效應(yīng)過程。因此,ATP也作為一類潛在疫苗佐劑得到進一步的開發(fā)和研究。復(fù)合佐劑是近年來佐劑研究的新熱點,由于一些疫苗佐劑單獨作用效果并不理想,而將多種疫苗佐劑復(fù)合使用以后卻能達到讓人滿意的效果,因此關(guān)于復(fù)合佐劑的研究也不斷深入。

6、本研究中,分別使用已經(jīng)得到廣泛運用的鋁佐劑以及實驗中制備的氫氧化鋅膠體佐劑,與ATP制備得到復(fù)合佐劑,再迸一步研究復(fù)合佐劑與鋁、鋅佐劑單獨作用的效果差異。實驗中,以人用狂犬病疫苗作為抗原,分別設(shè)置不添加佐劑的抗原對照組、僅添加鋁、鋅佐劑的單獨佐劑組和分別添加了ATP氫氧化鋁佐劑和ATP氫氧化鋅佐劑的復(fù)合佐劑組,對ICR小鼠進行免疫,在初次免疫后不同時間段通過問接ELISA法檢測小鼠血清中抗狂犬病病毒IgG的滴度進行免疫效果評價。體液免疫

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