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文檔簡介
1、該研究從細胞生物學(xué)和流行病學(xué)兩個方面分三個部分對其進行研究:1.乙肝病毒表面抗原作為單病原負荷對血管內(nèi)皮細胞與單核細胞相互作用的影響:該部分研究首先通過間接免疫熒光試驗確認HBsAg與血管內(nèi)皮細胞的粘附現(xiàn)象;然后,選擇整合有HBV全基因組的HepG2.2.15細胞的上清及HBV的主要結(jié)構(gòu)成份—乙肝病毒的表面抗原(HBsAg),分別與人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞株ECV-304和單核細胞株THP-1進行孵育,檢測其對這兩種細胞的粘附和趨化功能的影
2、響;并進一步檢測孵育后ECV-304細胞中與AS相關(guān)的部分趨化因子的表達.從免疫學(xué)、細胞生物學(xué)角度研究了HepG2.2.15細胞上清或乙肝病毒的表面抗原作為單病原負荷,對血管內(nèi)皮細胞與單核細胞相互作用的可能影響.2.乙肝病毒表面抗原在多病原負荷時對血管內(nèi)皮細胞與單核細胞相互作用的影響:為了進一步研究HBV及其結(jié)構(gòu)成份在多病原負荷狀態(tài)下,是否會對血管內(nèi)皮細胞與單核細胞的相互作用產(chǎn)生同樣影響.該部分引入了細菌源性感染因子LPS,探討雙病原負
3、荷狀態(tài)下,HBV及其結(jié)構(gòu)成份對單核細胞與血管內(nèi)皮細胞相互作用的影響.以LPS作用后的臍靜脈內(nèi)皮細胞ECV-304作為應(yīng)激狀態(tài)細胞模型,在此基礎(chǔ)上,進行粘附及趨化功能的檢測.結(jié)果表明,在應(yīng)激狀態(tài)下,HepG2.2.15細胞上清或HBsAg作用于臍靜脈內(nèi)皮細胞ECV-304,不能顯著影響其對單核細胞的趨化及粘附活性,而HBsAg作用于單核細胞THP-1,其不僅維持了其作為單病原負荷時,增加單核細胞粘附的特性(粘附細胞百分率依然維持在約40﹪
4、),還可顯著抑制應(yīng)激狀態(tài)下,ECV-304對THP-1的強趨化作用(趨化細胞百分率由約16﹪降至3﹪).進一步在mRNA水平檢測與HBsAg孵育后的THP-1,結(jié)果顯示,多個趨化因子受體水平顯著下調(diào).3.乙型肝炎感染與動脈粥樣硬化發(fā)病相關(guān)性的血清流行病學(xué)研究:為進一步澄清HBV在人群中的動脈粥樣硬化發(fā)病中是否發(fā)揮作用.我們收集了共446例行冠脈造影術(shù)的患者,根據(jù)冠脈造影結(jié)果將其分為冠脈狹窄組和非狹窄組,并用2復(fù)旦大學(xué)碩士論文ELISA方
5、法檢測患者血清中的乙肝病毒感染兩對半指標及CRP水平,從血清流行病學(xué)角度探討HBV感染的血清學(xué)指標、病毒載量和冠狀動脈粥樣硬化的發(fā)生及冠脈狹窄程度之間的關(guān)系;分析了HBV感染與其它動脈粥樣硬化傳統(tǒng)風(fēng)險因子之間可能存在的交互作用;并進一步研究了炎癥水平對HBV感染與動脈粥樣硬化關(guān)系的影響.綜上所述,我們的研究表明,HBsAg可以影響體外單核細胞與血管內(nèi)皮細胞的相互作用,在單個和多個病原負荷存在時,這種影響基本是一致的,即:HBV及其結(jié)構(gòu)成
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