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1、目的:研究高糖環(huán)境下內(nèi)皮細胞和單核細胞的相互作用對于MT1-MMP表達的影響。 方法:用密度梯度離心法分離健康成人外周血單核細胞,分別在不同葡萄糖濃度下(高糖30mmol/L,對照5.5mmol/L)條件下,將單核細胞和內(nèi)皮細胞系EVC-304單獨培養(yǎng)、混合培養(yǎng)和隔離共同培養(yǎng)(兩種細胞用0.45-μm的微孔濾器隔離)24小時后,將混合培養(yǎng)組的單核細胞與內(nèi)皮細胞分離,然后采用半定量RT-PCR法分別檢測干預后單核細胞和內(nèi)皮細胞MT
2、1-MMPmRNA的表達。將單核細胞與內(nèi)皮細胞分別在高糖和對照環(huán)境混合培養(yǎng)24h后,測定單核細胞與內(nèi)皮細胞的黏附。 結(jié)果:(1)單核細胞在高糖和對照環(huán)境中單獨培養(yǎng),以及對照環(huán)境中隔離共同培養(yǎng)24h,均未檢測到MT1-MMP的表達。單核細胞在高糖和對照環(huán)境中與內(nèi)皮細胞混合培養(yǎng)時以及高糖隔離共同培養(yǎng)條件下,其MT1-MMP表達顯著增高。且高糖混合培養(yǎng)組的MT1-MMP表達增加最為顯著(P<0.05)。(2)高糖單獨培養(yǎng)組內(nèi)皮細胞MT
3、1-MMP的表達較對照單獨培養(yǎng)組內(nèi)皮細胞減低(P<0.05)。高糖混合培養(yǎng)組和高糖隔離共同培養(yǎng)組內(nèi)皮細胞MT1-MMP表達均較單獨培養(yǎng)的內(nèi)皮細胞均顯著增高(P<0.05),且高糖混合培養(yǎng)組內(nèi)皮細胞MT1-MMP表達顯著高于高糖隔離共同培養(yǎng)組(P<0.05)。對照環(huán)境各組間內(nèi)皮細胞MT1-MMP的表達無顯著性差異。(3)在高糖環(huán)境中孵育24h后,單核細胞與內(nèi)皮細胞的黏附率較對照組顯著增高(P<0.05)。 結(jié)論:(1)高糖未引起單
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