菜蛾盤(pán)絨繭蜂畸形細(xì)胞調(diào)控寄主小菜蛾的生理機(jī)制研究.pdf

1、本文以蔬菜重要害蟲(chóng)—小菜蛾P(guān)lutellaxylostella(Linnaeus)及其優(yōu)勢(shì)種天敵菜蛾盤(pán)絨繭蜂Cotesiaplutellae(Kurdjumov)這一寄生體系為研究對(duì)象，主要對(duì)該體系中的寄生因子：畸形細(xì)胞的主要特性和生理功能及其對(duì)幼蜂生長(zhǎng)發(fā)育的協(xié)同作用展開(kāi)了研究，初步明確了菜蛾盤(pán)絨繭蜂畸形細(xì)胞調(diào)控寄主小菜蛾幼蟲(chóng)生理的一些途徑和作用機(jī)理，取得以下結(jié)果： 一.畸形細(xì)胞對(duì)寄主小菜蛾幼蟲(chóng)幼蟲(chóng)免疫系統(tǒng)的影響寄生后不同時(shí)間段

2、寄主小菜蛾幼蟲(chóng)血淋巴酚氧化酶(PO)活性均高于加PTU晶體處理的未寄生寄主小菜蛾血淋巴，但又明顯低于未加PTU晶體處理的未寄生寄主小菜蛾血淋巴PO活性，且不同時(shí)間均有變化；寄主幼蟲(chóng)血淋巴PO活性與畸形細(xì)胞對(duì)血淋巴PO活性的抑制能力有關(guān)，隨畸形細(xì)胞的發(fā)育成熟到衰亡，其對(duì)血淋巴PO活性的抑制能力先上升，而后下降。 畸形細(xì)胞與血細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)1h后，畸形細(xì)胞有50％以上被血細(xì)胞包囊，到第6h，達(dá)到100％，畸形細(xì)胞被血細(xì)胞吞噬或殺死

3、，數(shù)量迅速減少，12h時(shí)只有開(kāi)始時(shí)的20％左右；蜂卵與血細(xì)胞培養(yǎng)1h后，蜂卵的被包囊率為4.2％，12h后也只有49.2％，而血細(xì)胞仍有很大活性，數(shù)量變化也不大；當(dāng)畸形細(xì)胞、蜂卵和血細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)時(shí)，蜂卵和畸形細(xì)胞的被包囊率同比均略低于與血細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)時(shí)的被包囊率，可能是畸形細(xì)胞和蜂卵共培養(yǎng)時(shí)，增加彼此的活性，抵御包囊，并加速血細(xì)胞的降解。 二.菜蛾盤(pán)絨繭蜂對(duì)寄主小菜蛾幼蟲(chóng)營(yíng)養(yǎng)的調(diào)節(jié)和利用寄主小菜蛾被菜蛾盤(pán)絨繭蜂寄生后，其取食、

4、發(fā)育及營(yíng)養(yǎng)代謝在各種寄生因子的作用下伴隨幼蜂的發(fā)育而發(fā)生很大的變化，畸形細(xì)胞作為調(diào)節(jié)因子之一也發(fā)揮了重要的作用。通過(guò)比較寄生、未寄生寄主幼蟲(chóng)血淋巴蛋白濃度以及兩種血淋巴對(duì)幼蜂進(jìn)行體外培養(yǎng)的培養(yǎng)液的蛋白濃度，發(fā)現(xiàn)寄生寄主幼蟲(chóng)血淋巴比未寄生寄主幼蟲(chóng)血淋巴的蛋白濃度略低但差異不顯著，而未寄生寄主幼蟲(chóng)血淋巴幼蜂培養(yǎng)液的蛋白濃度顯著低于寄生寄主幼蟲(chóng)血淋巴幼蜂培養(yǎng)液的蛋白濃度，證明畸形細(xì)胞有蛋白質(zhì)分泌功能。寄生后期，寄生寄主體重明顯大于未寄生寄主體

5、重，而脂肪體重量相比正好相反；通過(guò)顯微染色觀察，在寄主念珠狀脂肪體表面粘附有畸形細(xì)胞，對(duì)脂肪體進(jìn)行分解破壞而使其成顆粒狀；蛋白含量和脂滴濃度測(cè)定也表明，脂肪體的可溶蛋白含量和脂滴濃度也迅速降低，同比低于未寄生寄主。而與此同時(shí)，幼蜂正處在快速生長(zhǎng)階段，中腸酯酶的活性逐步上升，幼蜂得以快速消化吸收寄主小菜蛾體內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)直到完成幼蟲(chóng)發(fā)育，整個(gè)幼蜂的脂滴濃度也達(dá)到了最大值。因此，寄生后期，在畸形細(xì)胞的協(xié)助下幼蜂吸收了寄主小菜蛾體內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)為自身生長(zhǎng)

6、發(fā)育所用。 三.畸形細(xì)胞及幼蜂的分泌功能寄生、未寄生寄主小菜蛾不同發(fā)育天數(shù)血淋巴蛋白SDS-PAGE電泳結(jié)果表明，它們之間并無(wú)十分明顯的差異，蛋白條帶最多的是寄生后第5d及同期未寄生第4d(化蛹前1d)的寄主幼蟲(chóng)血淋巴，其中72KDa和92KDa的蛋白在寄生、未寄生寄主幼蟲(chóng)血淋巴中都有分布，而只有寄生寄主幼蟲(chóng)血淋巴中出現(xiàn)了62KDa的蛋白；不同日齡的畸形細(xì)胞培養(yǎng)液中都有92KDa的蛋白條帶出現(xiàn)；而幼蜂培養(yǎng)液中卻有豐富的62KDa