菜蛾盤絨繭蜂畸形細胞調(diào)控寄主小菜蛾的生理機制研究.pdf

1、本文以蔬菜重要害蟲—小菜蛾P(guān)lutellaxylostella(Linnaeus)及其優(yōu)勢種天敵菜蛾盤絨繭蜂Cotesiaplutellae(Kurdjumov)這一寄生體系為研究對象，主要對該體系中的寄生因子：畸形細胞的主要特性和生理功能及其對幼蜂生長發(fā)育的協(xié)同作用展開了研究，初步明確了菜蛾盤絨繭蜂畸形細胞調(diào)控寄主小菜蛾幼蟲生理的一些途徑和作用機理，取得以下結(jié)果： 一.畸形細胞對寄主小菜蛾幼蟲幼蟲免疫系統(tǒng)的影響寄生后不同時間段

2、寄主小菜蛾幼蟲血淋巴酚氧化酶(PO)活性均高于加PTU晶體處理的未寄生寄主小菜蛾血淋巴，但又明顯低于未加PTU晶體處理的未寄生寄主小菜蛾血淋巴PO活性，且不同時間均有變化；寄主幼蟲血淋巴PO活性與畸形細胞對血淋巴PO活性的抑制能力有關(guān)，隨畸形細胞的發(fā)育成熟到衰亡，其對血淋巴PO活性的抑制能力先上升，而后下降。 畸形細胞與血細胞進行體外培養(yǎng)1h后，畸形細胞有50％以上被血細胞包囊，到第6h，達到100％，畸形細胞被血細胞吞噬或殺死

3、，數(shù)量迅速減少，12h時只有開始時的20％左右；蜂卵與血細胞培養(yǎng)1h后，蜂卵的被包囊率為4.2％，12h后也只有49.2％，而血細胞仍有很大活性，數(shù)量變化也不大；當畸形細胞、蜂卵和血細胞進行共培養(yǎng)時，蜂卵和畸形細胞的被包囊率同比均略低于與血細胞單獨培養(yǎng)時的被包囊率，可能是畸形細胞和蜂卵共培養(yǎng)時，增加彼此的活性，抵御包囊，并加速血細胞的降解。 二.菜蛾盤絨繭蜂對寄主小菜蛾幼蟲營養(yǎng)的調(diào)節(jié)和利用寄主小菜蛾被菜蛾盤絨繭蜂寄生后，其取食、

4、發(fā)育及營養(yǎng)代謝在各種寄生因子的作用下伴隨幼蜂的發(fā)育而發(fā)生很大的變化，畸形細胞作為調(diào)節(jié)因子之一也發(fā)揮了重要的作用。通過比較寄生、未寄生寄主幼蟲血淋巴蛋白濃度以及兩種血淋巴對幼蜂進行體外培養(yǎng)的培養(yǎng)液的蛋白濃度，發(fā)現(xiàn)寄生寄主幼蟲血淋巴比未寄生寄主幼蟲血淋巴的蛋白濃度略低但差異不顯著，而未寄生寄主幼蟲血淋巴幼蜂培養(yǎng)液的蛋白濃度顯著低于寄生寄主幼蟲血淋巴幼蜂培養(yǎng)液的蛋白濃度，證明畸形細胞有蛋白質(zhì)分泌功能。寄生后期，寄生寄主體重明顯大于未寄生寄主體

5、重，而脂肪體重量相比正好相反；通過顯微染色觀察，在寄主念珠狀脂肪體表面粘附有畸形細胞，對脂肪體進行分解破壞而使其成顆粒狀；蛋白含量和脂滴濃度測定也表明，脂肪體的可溶蛋白含量和脂滴濃度也迅速降低，同比低于未寄生寄主。而與此同時，幼蜂正處在快速生長階段，中腸酯酶的活性逐步上升，幼蜂得以快速消化吸收寄主小菜蛾體內(nèi)的營養(yǎng)直到完成幼蟲發(fā)育，整個幼蜂的脂滴濃度也達到了最大值。因此，寄生后期，在畸形細胞的協(xié)助下幼蜂吸收了寄主小菜蛾體內(nèi)的營養(yǎng)為自身生長

6、發(fā)育所用。 三.畸形細胞及幼蜂的分泌功能寄生、未寄生寄主小菜蛾不同發(fā)育天數(shù)血淋巴蛋白SDS-PAGE電泳結(jié)果表明，它們之間并無十分明顯的差異，蛋白條帶最多的是寄生后第5d及同期未寄生第4d(化蛹前1d)的寄主幼蟲血淋巴，其中72KDa和92KDa的蛋白在寄生、未寄生寄主幼蟲血淋巴中都有分布，而只有寄生寄主幼蟲血淋巴中出現(xiàn)了62KDa的蛋白；不同日齡的畸形細胞培養(yǎng)液中都有92KDa的蛋白條帶出現(xiàn)；而幼蜂培養(yǎng)液中卻有豐富的62KDa