流式微球技術檢測GPⅡb-Ⅲa自身抗體在ITP診斷中的臨床意義.pdf

1、研究背景：
　　原發(fā)免疫性血小板減少癥(Primary immune thrombocytopenia，ITP）是臨床上常見的出血性疾病，發(fā)病機制尚未完全明確，目前認為ITP是體液免疫和細胞免疫異常導致血小板破壞增多、生成減少而最終以外周血血小板減少、皮膚黏膜出血為特征的疾病。目前，ITP仍為排除性診斷，尚無可供應用的“金標準”，需要排除自身免疫性疾病和其他原因所致繼發(fā)性血小板減少之后才能診斷ITP。因此非常需要一個特異性強的實驗

2、室診斷指標，以進一步確定臨床診斷，并能鑒別免疫性與非免疫性血小板減少。目前主要研究血小板特異性抗體一血小板膜表面糖蛋白（GP）抗體，血小板特異性自身抗體通常是針對血小板膜GPⅡb/Ⅱa或GPIb/Ⅸ[3]，針對血小板表面膜GP特異性自身抗體的檢測方法主要有單克隆抗體俘獲血小板抗原技術（MAIPA）,放射免疫微球技術等,這些方法特異性較高,約為78％一93%,對于鑒別 ITP與非免疫性血小板減少有一定價值,但敏感性偏低,為49%一66%。

3、因這些方法實驗室要求高，且操作繁瑣,耗時長,難以在臨床廣泛開展[5]。流式微球技術（Cytometric Bead Array，CBA）是基于流式細胞術發(fā)展起來的一項新技術，它以聚苯乙烯微球為反應界面，利用特異性單克隆抗體包被后即可俘獲一些小分子物質(zhì)，通過檢測微球的“放大”作用對一些小分子物質(zhì)進行檢測。目前國內(nèi)外學者將CBA應用于血小板膜表面GP自身抗體的檢測，其對ITP診斷的特異性和敏感性均較高,且其耗時短，重復性好。
　　目的

4、：
　　應用流式微球技術檢測血小板GPIIb/IIIa自身抗體，以探討其在ITP中的診斷價值。
　　方法：
　　選取石河子大學醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院就診的ITP患者、非免疫性血小板減少癥患者及健康體檢者，抽取外周靜脈血，應用流式微球技術檢測血小板GPⅡb/Ⅱa自身抗體，記錄各個樣本的平均熒光強度（MFI），計算樣本的MFI與正常對照（三個不同正常人血樣）MFI均值的比率。同時對所選樣本抽取外周血進行T淋巴細胞亞群檢測。

5、r>　　結(jié)果：
　　1.ITP組、非免疫性血小板減少組和正常對照組的MFI比率分別為（2.61±1.09）、（1.32±0.59）和（0.95±0.40），非參數(shù)檢驗得ITP組MFI比率高于非免疫性血小板減少組和正常對照組（P值均小于0.01），而后兩者MFI比率差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　2.如果將正常對照組的上限設為界值,比率大于1.93視為陽性,則流式微球技術對ITP診斷的敏感性為71.88%,特異性為84

6、.62%,由ROC曲線得流式微球技術區(qū)分ITP患者與非免疫性血小板減少患者的能力(鑒別效度)為0.848。
　　3.T淋巴細胞亞群檢測中，ITP組CD3+ T淋巴細胞百分比（63.81±8.23）%、CD4+T淋巴細胞百分比（32.89±7.24）%、CD4+/CD8+比值（1.32±0.48）均低于健康對照組[（70.86±10.16）%、（41.39±6.41）%、（1.98±0.41）]（P<0.05），而CD8+T淋巴細胞