Rituximab單點突變體H102YK抗腫瘤作用及機制研究.pdf

1、淋巴瘤是淋巴系統(tǒng)的惡性腫瘤，國內(nèi)外流行病學研究表明約90％的淋巴瘤為非霍奇金淋巴瘤(NonHodgkin’slymphoma，NHL)，而這其中B細胞來源的約占85％，其病因主要涉及病毒、細菌放射線、某些化學物質(zhì)以及除莠劑等多種因素。近年來，NHL的發(fā)病率逐年穩(wěn)定持續(xù)升高。傳統(tǒng)的放化療雖然能給患者帶來一定的臨床獲益，但患者經(jīng)過治療的完全緩解率(CR)較低。
　　 分子靶向治療是指針對參與了腫瘤發(fā)生發(fā)展過程的細胞信號轉(zhuǎn)導和其他生物

2、學途徑的治療手段。本世紀以來，分子靶向治療在腫瘤學的廣泛應用，給各種腫瘤尤其是NHL的治療帶來了革命性的變化，已成為腫瘤學研究的熱點和主要方向，推動著腫瘤治療理念和理論的發(fā)展。
　　 CD20為一種B細胞分化抗原，由Stashenko等人于1980年發(fā)現(xiàn)，在正常人體內(nèi)僅表達于前B細胞和成熟的B淋巴細胞，但卻在95％以上的B細胞淋巴瘤中表達，因此成為B細胞淋巴瘤的治療的理想靶點。
　　 利妥昔單抗(Rituximab，C2

3、88，商品名美羅華)是美國Genetech公司研制的以人CD20分子為靶點的人鼠嵌合單克隆抗體(monoclonalantibody，mAb)，于1997年被FDA批準上市，現(xiàn)廣泛用于治療CD20陽性的B細胞非霍奇金淋巴瘤、慢性淋巴細胞白血病(CLL)以及類風濕性關(guān)節(jié)炎。然而隨著其廣泛應用，也帶來了一系列的問題，其中最主要的是耐藥問題。很多患者在初次接受Rituximab治療時就對其無反應，而有些患者初次治療時效果很好，但是經(jīng)過一段時間

4、的治療后，效果就越來越差。因此，如何解決利妥昔單抗的耐藥問題成為目前廣大基礎(chǔ)和臨床科研工作者函待解決的主要問題。
　　 目前的研究表明，CD20抗體與細胞表面的CD20結(jié)合后主要通過以下三個機制殺傷腫瘤細胞，1)補體依賴的細胞溶解作用(CDC作用)；2)抗體依賴細胞介導的細胞毒作用(ADCC)；3)誘導腫瘤細胞細胞凋亡。目前的研究主要根據(jù)CD20抗體與靶細胞的CD20結(jié)合后的轉(zhuǎn)脂伐能力將其分為兩型，Ⅰ型抗體以Rituximab為

5、代表，其主要作用機制包括CDC、ADCC，而誘導腫瘤細胞凋亡的能力很弱。Ⅱ型抗體以B1等為代表，其主要作用機制包括ADCC、誘導腫瘤絀胞凋亡，而CDC作用很弱。
　　 本實驗室前期采用計算機輔助設(shè)計的方法在Rituximab抗體的互補決定域(CDR)進行虛擬突變，篩選出了一系列的Rituximab突變體，在這其中我們發(fā)現(xiàn)一株單點突變體，其從轉(zhuǎn)脂筏能力來講仍屬于Ⅰ型CD20抗體，但是卻具有與Ⅱ型CD20抗體相當?shù)恼T導腫瘤細胞凋亡的