高效、低毒免疫毒素SM5-1-PE38KDEL（突變體）的構(gòu)建及其抗腫瘤作用機(jī)理的研究.pdf

1、　　SM5-1是本研究所自主篩選克隆的小鼠抗人單克隆抗體，其抗原p230特異表達(dá)于人肝癌、乳腺癌和黑色素瘤細(xì)胞表面。利用單克隆抗體SM5-1對401例臨床黑色素瘤標(biāo)本(250例原發(fā)，151例轉(zhuǎn)移)的篩查中，p230在98％的標(biāo)本中表達(dá)，而在正常組織中，除在汗腺和漿細(xì)胞表面有少量表達(dá)外，在其它正常組織中均不表達(dá)。用流式細(xì)胞儀對十余株肝癌、乳腺癌和黑色素瘤細(xì)胞株篩查結(jié)果中發(fā)現(xiàn)，p230不僅表達(dá)于黑色素瘤細(xì)胞，還表達(dá)于肝癌和乳腺癌細(xì)胞，而且在

2、肝癌細(xì)胞的表達(dá)水平更高，理論上為一理想的腫瘤治療靶點(diǎn)?！　≡诒卷?xiàng)目中，擬通過計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)失去血管內(nèi)皮細(xì)胞接觸作用而保留細(xì)胞毒活性的PE分子突變體，構(gòu)建以SM5-1單鏈抗體為載體而以高效低毒PE突變體為彈頭的新型免疫毒素，通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)考察免疫毒素的生物學(xué)功能?！　〉谝徊糠痔烊恍兔庖叨舅豐M5-1-PE38KDEL基因克隆及表達(dá)載體的構(gòu)建?！　〉诙糠置庖叨舅豐M5-1-PE38KDEL突變體的設(shè)計(jì)及表達(dá)載體的構(gòu)建?！　〉谌糠?/p>

3、免疫毒素SM5-1-PE38KDEL及其突變體的表達(dá)與純化?！　〉谒牟糠置庖叨舅豐M5-1-PE38KDEL及其突變體的體外活性的檢測。首　　第五部分免疫毒素SM5-1-PE38KDEL及其突變體的體內(nèi)毒性及抗腫瘤作用研究?！　〉诹糠置庖叨舅豰ut1的抗腫瘤機(jī)理探討?！　”疚某晒?gòu)建了免疫毒素SM5-1-PE38KDEL及其8個突變體。通過體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，得到一個高效、低毒的免疫毒素突變體1，能夠明顯地預(yù)防腫瘤的發(fā)生和使腫瘤消