骶神經(jīng)電刺激對脊髓損傷后腸道菌群移位和內(nèi)毒素血癥的實驗研究.pdf

1、目的：
　　 探討骶3神經(jīng)根電刺激對急性完全性脊髓損傷致截癱后腸道功能障礙的并發(fā)癥腸道細(xì)菌移位和內(nèi)毒素血癥的影響。以揭示急性完全性脊髓損傷后腸道功能障礙導(dǎo)致腸道菌群移位的確切機(jī)制，闡明電刺激骶神經(jīng)根的治療原理，為臨床治療提供理論依據(jù)和治療的新思路。
　　 方法：
　　 1、脊髓損傷后腸道功能紊亂模型：采用Fehlings法，用動脈瘤血管夾橫行鉗夾脊髓致橫斷。通過監(jiān)測SCI前、后（10、30、90和120 min）

2、體感誘發(fā)電位和運(yùn)動誘發(fā)電位共同驗證脊髓是否完全橫斷。一部分（6只）家兔脊髓損傷前后分別記錄胃腸多點生物放電、結(jié)腸腸管內(nèi)壓力和直腸肛門反射情況；另一部分（6只）家兔觀察脊髓損傷后腹部癥狀及排便情況，于24小時剖腹觀察腸道狀況。
　　 2、脊髓損傷后，骶3神經(jīng)根植入電極，電刺激采用從低到高的刺激強(qiáng)度直到家兔的尾巴和下肢出現(xiàn)顫抖性運(yùn)動（閾值），以此為基礎(chǔ)，采用三個強(qiáng)度參數(shù)（6、8、10伏）進(jìn)行刺激，波頻15Hz，波寬固定為400μs；

3、然后固定刺激強(qiáng)度（6伏），分別采用（200、400和600μs）進(jìn)行刺激，記錄后進(jìn)行分析，尋找最適合家兔的刺激參數(shù)，并觀察大小便改善情況。
　　 3、兔脊髓損傷后截癱，以截癱后行骶3神經(jīng)根電刺激為實驗組（18只），不做刺激截癱兔為對照組（18只），正常白兔為正常對照組（6只）。刺激參數(shù)為頻率15HZ，波寬400μs，強(qiáng)度6-10伏，刺激時間10S，間歇時間20S，刺激10 min間隔10 min，每次刺激周期為兩小時，每天兩次（

4、8：00-10：00 am、6：00-8：00 pm）。實驗組和對照組分別于24 h、48 h和72 h（每點各6只）在無菌條件下，采集動物門靜脈血進(jìn)行內(nèi)毒素定量測定和細(xì)菌培養(yǎng)，采集肝、脾、腸系膜淋巴結(jié)作細(xì)菌培養(yǎng)并進(jìn)行菌種鑒定。取實驗組和對照組各動物的肝、脾、腸系膜淋巴結(jié)、小腸進(jìn)行病理切片HE染色檢查，取小腸進(jìn)行電鏡檢查。
　　 結(jié)果:
　　 1、胸6節(jié)段鉗夾致急性完全性脊髓損傷后立即出現(xiàn)尿潴留，腹脹進(jìn)行性加重，排便困難

5、；全胃腸道功能紊亂，小腸腸管脹氣明顯，腸壁透光性增強(qiáng)，蠕動減弱；盲腸、結(jié)腸和直腸大量糞便堆積，觸之較硬結(jié)，遠(yuǎn)端腸道蠕動明顯減弱。主要病理生理改變以單袋結(jié)腸和遠(yuǎn)端結(jié)腸蠕動減弱、直腸肛管順應(yīng)性降低為主。胸6水平鉗夾致急性完全性脊髓損傷后胃腸道功能紊亂模型是研究脊髓損傷后腸道細(xì)菌移位和內(nèi)毒素血癥的較好的模型。
　　 2、利用本實驗中得到的電刺激參數(shù)，發(fā)現(xiàn)脊髓損傷后SNS能較好的恢復(fù)失神經(jīng)腸道蠕動（主要單袋結(jié)腸、遠(yuǎn)端結(jié)腸）和直腸肛管的協(xié)

6、調(diào)性，從而促進(jìn)大便排出；排大便不如排尿迅速，需要較高的刺激強(qiáng)度和刺激時間。
　　 3、對照組和實驗組脊髓損傷后都有內(nèi)毒素血癥和腸道細(xì)菌移位發(fā)生。電刺激S3神經(jīng)根使實驗組家兔排出的腸內(nèi)容物明顯增加（F=19.974，P=0.000），使血清內(nèi)毒素定量水平下降致正常水平（F=16.786，P=0.000）且細(xì)菌移位發(fā)生率呈顯著性減少（n=18，P<0.01）。而對照組家兔隨截癱時間的延長，內(nèi)毒素血癥含量和細(xì)菌移位的發(fā)生率不斷的增多，

7、各個組織的病理變化隨著便秘程度的加重和內(nèi)毒素水平的增高而越來越明顯。但實驗組的病理變化則沒有對照組那么明顯。
　　 結(jié)論:
　　 1、胸6水平急性完全性脊髓損傷后可出現(xiàn)腹脹進(jìn)行性加重，排便困難。單袋結(jié)腸和遠(yuǎn)端結(jié)腸的運(yùn)動功能障礙，直腸肛管協(xié)調(diào)性改變，腸黏膜結(jié)構(gòu)損害導(dǎo)致通透性增加以及腸道內(nèi)大便的儲留，細(xì)菌過度生長為急性脊髓損傷后內(nèi)毒素血癥和腸道細(xì)菌移位的病理機(jī)制。
　　 2、SNS能較好的恢復(fù)失神經(jīng)腸道蠕動（主要單袋

8、結(jié)腸、遠(yuǎn)端結(jié)腸）和直腸肛管的協(xié)調(diào)性，促進(jìn)排便；排尿更早發(fā)生。本實驗發(fā)現(xiàn)刺激參數(shù)為頻率15HZ，波寬400μs，強(qiáng)度6-10伏，刺激時間10S，間歇時間20s，刺激10min間隔10min，每次刺激周期為兩小時，每天兩次（8：00-10：00 am、6：00-8：00 pm）較適合家兔。
　　 3、急性脊髓損傷后電刺激骶3神經(jīng)根能較好促進(jìn)腸道蠕動，促進(jìn)腸內(nèi)容物的排出，進(jìn)而減輕內(nèi)毒素血癥和腸道細(xì)菌移位；有利于減少全身炎癥反應(yīng)綜合癥和