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1、目的:建立戊四氮(Pentylenetetrazol, PTZ)點(diǎn)燃癲癇發(fā)育期大鼠模型,選擇大鼠行為學(xué)改變、海馬結(jié)構(gòu)病理形態(tài)學(xué)指標(biāo),觀察銀杏葉提取物(Extract of Ginkgo biloba leaves, EGb)對(duì)點(diǎn)燃癲癇發(fā)育期大鼠的干預(yù)作用,并探討其干預(yù)機(jī)制之一,為拓展銀杏葉提取物的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:健康21日齡Sprague Dawley大鼠(簡(jiǎn)稱SD大鼠)隨機(jī)分成5組,每組確保8只:①正常NS
2、對(duì)照組(Normal saline, NS+NS組);②PTZ+5%乙醇7天(day, d)組;③PTZ+5%乙醇14d組;④PTZ+EGb7d組;⑤PTZ+EGb14d組。觀察點(diǎn)燃及治療過程中各組大鼠的發(fā)作情況,以Y-型電迷宮及Morris水迷宮評(píng)價(jià)各組大鼠的認(rèn)知功能,以病理方法評(píng)價(jià)海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡的表達(dá)。
結(jié)果:1.行為學(xué)變化:1.1 PTZ點(diǎn)燃后,PTZ點(diǎn)燃各組大鼠均有自發(fā)性的癇性發(fā)作,及時(shí)給予EGb治療后,癇性發(fā)作
3、次數(shù)明顯減少(P<0.05),而EGb治療7d與14d組大鼠癇性發(fā)作次數(shù)相互比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。1.2 Y-型電迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果:PTZ點(diǎn)燃各組較正常NS對(duì)照組大鼠學(xué)會(huì)達(dá)標(biāo)次數(shù)明顯增多(P<0.05),EGb治療14d與7d組較相對(duì)應(yīng)的PTZ點(diǎn)燃對(duì)照組大鼠學(xué)會(huì)達(dá)標(biāo)次數(shù)明顯減少(P<0.05),但是EGb治療7d與14d組相互比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。1.3 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果:①逃避潛伏期:各組逃避潛伏期均呈逐
4、漸縮短趨勢(shì),但PTZ點(diǎn)燃各組均長(zhǎng)于正常NS對(duì)照組(P<0.05),經(jīng)EGb治療后,逃避潛伏期明顯縮短,仍長(zhǎng)于正常NS對(duì)照組(P<0.05),而EGb治療7d與14d組大鼠逃避潛伏期相互比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。②搜尋策略與記憶實(shí)驗(yàn)結(jié)果:PTZ點(diǎn)燃各組大鼠靶象限活動(dòng)時(shí)間百分比均低于正常NS對(duì)照組(P<0.05),EGb治療后,EGb治療7d與14d組大鼠在測(cè)試的第3,4天時(shí)成績(jī)均優(yōu)于單純PTZ點(diǎn)燃組(P<0.05),而仍差于正常N
5、S對(duì)照組(P<0.05),但是EGb治療7d與14d組相互比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。PTZ點(diǎn)燃各組大鼠穿越平臺(tái)次數(shù)均少于正常NS對(duì)照組(P<0.05), EGb治療7d和14d兩組大鼠穿越平臺(tái)次數(shù)均多于單純PTZ點(diǎn)燃對(duì)照組,但仍少于正常NS對(duì)照組(P<0.05),而EGb治療7d與14d組大鼠穿越平臺(tái)次數(shù)相互比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。2.形態(tài)學(xué)觀察:2.1海馬病理形態(tài)學(xué)改變:?jiǎn)渭働TZ點(diǎn)燃各組可見海馬神經(jīng)細(xì)胞腫脹,體積增
6、大,典型的多角形變?yōu)閳A形或三角形,胞核移位,胞質(zhì)濃縮、深染、核破裂,以CA3區(qū)為著,EGb治療后神經(jīng)細(xì)胞損傷明顯減輕,EGb治療7d與14d組相互比較神經(jīng)細(xì)胞無(wú)明顯變化。2.2神經(jīng)細(xì)胞凋亡結(jié)果:TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞主要分布在海馬,以CA3區(qū)為著,單純PTZ點(diǎn)燃組海馬CA3區(qū)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯高于正常NS對(duì)照組(P<0.05), EGb治療后海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡較單純PTZ點(diǎn)燃組明顯減少(P<0.05),但是EGb治療7d與14d組相互比較神經(jīng)細(xì)胞
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