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文檔簡介
1、目的:卵巢過度刺激綜合征是促排卵過程中發(fā)生的醫(yī)源性并發(fā)癥。其病理生理改變主要為毛細血管通透性增加,血漿外滲,形成腹水、胸水,血液濃縮及其引發(fā)的一系列改變,涉及到循環(huán)、呼吸、消化、凝血等多器官系統(tǒng),嚴重者可危及生命。近年,OHSS的發(fā)病率逐漸增高,但發(fā)病機制卻未完全闡明,臨床治療僅為支持對癥治療。探索OHSS的發(fā)病機制,尋找對因治療具有重要的現(xiàn)實意義。
目前,對細胞離子方面的研究鮮有報道,而血管通透性的改變與細胞離子的變化息
2、息相關,密不可分。所以,本研究從離子角度出發(fā),研究卵巢過度刺激綜合征發(fā)病過程中細胞內游離鈣、鈉、鉀、氯離子濃度有無變化、如何變化。探索各離子變化與OHSS發(fā)病的相關性。為尋找安全、有效、經(jīng)濟、簡便的治療方案提供理論依據(jù)。
材料與方法:22—25日齡50g—70g Wistar清潔級雌性大鼠隨機分為實驗組、對照組,每組5—6只。實驗組制作卵巢過度刺激綜合征模型:PMSG50IU每日注射共4天,第5天給予HCG100IU,注射
3、。對照組注射等體積的生理鹽水。
最后一次注射后72小時采血,測定血漿雌二醇、血管內皮生長因子水平,卵巢、子宮取出稱重確定模型成功。
熒光染色方法測定細胞內游離Ca2+、Na+、K+、Cl-離子濃度。冷生理鹽水洗滌紅細胞,制備細胞懸液,調節(jié)紅細胞密度為20×109/l。制備Ca2+、Na+、K+、Cl-熒光探針Fluo-3/AM、SBFI-AM、PBFI-AM、MQAE的應用液,分別裝載紅細胞,每100μl為一
4、個裝載單位,37℃孵育60分鐘。洗去細胞外探針后,繼續(xù)孵育30分鐘。顯微熒光分光光度計調節(jié)到相應激發(fā)波長和發(fā)射波長,分別測定細胞內與各離子結合的相應探針的光度值,此光度值反應細胞內游離離子的平均濃度。
結果:實驗組卵巢、子宮重量,血漿雌二醇、VEGF水平與對照組比較均明顯增加,差異具顯著性意義(P<0.01),大鼠卵巢過度刺激模型建立成功。
實驗組與對照組各離子探針的熒光光度值分別為:Ca2+∶12.04±0
5、.55、22.42±2.51;Na+∶10.48±0.20、34.27±1.05;K+∶13.98±0.69、9.59±1.42;Cl-∶470±47.36、243.1±21.1。兩組比較,差異均具顯著性意義(P<0.01)。
結論:卵巢過度刺激綜合征時細胞內游離鈣、鈉、鉀、氯離子濃度變化顯著。其中鈣、鈉、氯離子濃度降低,鉀離子濃度升高。這些離子濃度的變化與血管內皮細胞功能改變密切相關。這些發(fā)現(xiàn)為探索新的治療方法打下基礎。
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