常見熒光增白劑的分析方法及與生物分子相互作用的研究.pdf

1、本文對常見水溶性熒光增白劑(FWA)CBS-X、VBL及BBU的光譜性質(zhì)、定量分析方法及與生物分子的相互作用進(jìn)行了研究。全文分為三章:
　　 第一章對熒光增白劑的作用原理、通性、分類方法和毒理學(xué)性質(zhì);環(huán)境毒理學(xué)和分子毒理學(xué)的基本概念及研究進(jìn)展;熒光增白劑定量分析和毒性分析的主要研究方法進(jìn)行了綜述。對熒光增白劑造成的環(huán)境問題進(jìn)行了分析。
　　 第二章分為兩部分。第一部分研究了FWA的光譜性質(zhì)。結(jié)果表明,在不同溶劑中,FWA

2、的紫外-可見吸收光譜,熒光光譜,熒光量子產(chǎn)率等性質(zhì)均符合Lippert方程和經(jīng)典光譜學(xué)理論。在不同pH值的水溶液中,其熒光強(qiáng)度均在pH為4左右,即凈電荷為零時達(dá)到最小值。在不同溶劑中的光漂白動力學(xué)曲線顯示,CBS-X由于空間位阻大,具有很高的光穩(wěn)定性;而VBL和BBU由于具有不穩(wěn)定的二苯乙烯結(jié)構(gòu),容易發(fā)生順反異構(gòu)變化。
　　 第二部分研究了FWA的定量分析方法。在2×10-4mol/L的十六烷基三甲基溴化銨溶液中,CBS-X的熒

3、光強(qiáng)度明顯增加,而VBL和BBU熒光強(qiáng)度幾乎不變;在弱酸性乙醇溶液中,VBL和BBU的熒光強(qiáng)度明顯增加,而CBS-X的熒光強(qiáng)度不受影響;結(jié)合由Surfer軟件疊加而成的三維同步熒光光譜,確定了CBS-X、VBL、BBU的最佳同步熒光掃描波長差分別為78nm、92nm、136nm;由此實(shí)現(xiàn)了混合物中三種熒光增白劑的同時測定。對CBS-X:檢出限0.078ng/mL,線性范圍2.47×10-10-9.73×10-8mol/L,回收率93.3

4、-101.6％;對VBL:檢出限29.51ng/mL,線性范圍0-1.58×10-6mol/L,回收率92.7-102.0％;對BBU:檢出限20.28ng/mL,線性范圍0-1.04×10-6mol/L,回收率95.2-102.6％。
　　 第三章同樣分為兩部分。第一部分應(yīng)用熒光共振能量轉(zhuǎn)移法和同步熒光法,研究了FWAs與牛血清白蛋白(BSA)和核黃素(RF)的相互作用。結(jié)果表明,FWAs與BSA和RF均有較大程度的能量轉(zhuǎn)移現(xiàn)

5、象發(fā)生。由此測定了FWAs與生物分子相互作用的猝滅方式,猝滅常數(shù),結(jié)合常數(shù),結(jié)合位點(diǎn)數(shù),結(jié)合距離,熱力學(xué)常數(shù)和結(jié)合類型。FWAs與生物分子間主要發(fā)生靜態(tài)猝滅,除CBS-X主要以氫鍵和范德華力與RF分子結(jié)合外,其余供體均以靜電力與受體相結(jié)合。
　　 第二部分應(yīng)用上述數(shù)據(jù)及文獻(xiàn)已有的基礎(chǔ)數(shù)據(jù),分析了FWAs的吸收特性、分子毒性、細(xì)胞毒性和致病性。結(jié)果表明,FWAs難以通過自由擴(kuò)散進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),且在體內(nèi)水解困難,僅以疏水作用破壞細(xì)胞膜蛋