生物大分子與有機小分子相互作用的熒光法研究.pdf

1、熒光光譜法作為一種重要的現(xiàn)代儀器分析方法，它具有靈敏度高、選擇性強、用量少、方法簡便、信息多樣等優(yōu)點，因而被廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物學(xué)、藥學(xué)、醫(yī)學(xué)、環(huán)境科學(xué)等領(lǐng)域。本文提出以巴比妥、酞紫、甲基百里酚藍(lán)和達(dá)旦黃為熒光探針，研究結(jié)果表明： 1.采用熒光光譜法分別研究了巴比妥、酞紫與牛血清白蛋白相互作用的特點，實驗發(fā)現(xiàn)巴比妥、酞紫對牛血清白蛋白均有較強的熒光猝滅作用。利用熒光猝滅理論，分別研究了巴比妥、酞紫對牛血清白蛋白的猝滅機理，測定了

2、兩個反應(yīng)體系的結(jié)合常數(shù)、結(jié)合位點數(shù)及熱力學(xué)參數(shù)△G、△H和△S，根據(jù)熱力學(xué)參數(shù)和離子強度實驗確定了兩者的作用力類型。采用同步熒光技術(shù)分別考察了巴比妥、酞紫對牛血清白蛋白構(gòu)象的影響。 2.采用熒光光譜法和紫外—可見吸收光譜法分別研究了甲基百里酚藍(lán)、達(dá)旦黃與牛血清白蛋白結(jié)合反應(yīng)的特征。實驗發(fā)現(xiàn)：甲基百里酚藍(lán)、達(dá)旦黃對牛血清白蛋白均有較強的熒光猝滅作用，根據(jù)熒光猝滅數(shù)據(jù)，由Stern-Volmer方程和Lineweaver-Burk雙

3、倒數(shù)方程得到了反應(yīng)的結(jié)合常數(shù)和熱力學(xué)參數(shù)，并由此推出了結(jié)合反應(yīng)的主要作用力類型。在此基礎(chǔ)上依據(jù)Forester非輻射能量轉(zhuǎn)移理論，分別探討了甲基百里酚藍(lán)、達(dá)旦黃與牛血清白蛋白相互結(jié)合時，給體—受體間的距離和能量轉(zhuǎn)移效率。從而證實了反應(yīng)為靜態(tài)猝滅過程，且闡明了其猝滅機制是通過能量轉(zhuǎn)移產(chǎn)生的。 3.對達(dá)旦黃與DNA的結(jié)合反應(yīng)進(jìn)行熒光光譜法、紫外光譜法等方面的研究，結(jié)果表明：在pH=7.4的溶液中達(dá)旦黃與DNA的雙螺旋堿基對之間存在嵌