和厚樸酚及厚樸酚在大鼠肝微粒體中的代謝及其對CYP450酶的影響.pdf

1、肝臟是人體內(nèi)物質(zhì)代謝的主要器官，機(jī)體60％以上的藥物都通過肝臟細(xì)胞色素P450(CYP450)單加氧酶系統(tǒng)代謝。研究藥物經(jīng)CYP450介導(dǎo)的生物轉(zhuǎn)化，明確其代謝途徑，對制定合理的臨床用藥方案、劑型設(shè)計(jì)及新藥開發(fā)工作都具有重要的指導(dǎo)意義。藥物對其他藥物代謝的潛在影響，則可以通過該藥物對各CYP450亞型底物代謝的影響來預(yù)測。近年來越來越多的研究者意識到使用肝微粒體進(jìn)行細(xì)胞色素P450活性測定的重要性。肝微粒體含有肝臟表達(dá)的所有參與藥物代謝

2、的CYP450酶，因此既可以用于研究任何目標(biāo)CYP450酶，又可以用于評價某一藥物是否為代謝依賴性的抑制劑，即某一藥物經(jīng)代謝生成的代謝產(chǎn)物可以抑制另外一個酶的活性；且肝微粒體易于制備，可長期保存等。
　　 無論中藥的成分有多復(fù)雜，都要經(jīng)過CYP450這一關(guān)，所以研究中藥與CYP450酶系的關(guān)系意義重大。不但可以推知中藥的體內(nèi)代謝過程，而且可以為臨床中西藥物的合理搭配使用提供直接依據(jù)。
　　 厚樸酚及和厚樸酚為同分異構(gòu)體，

3、為中藥厚樸的主要成分，藥理作用和臨床應(yīng)用非常廣泛。本文選取這兩種中藥活性成分，以大鼠肝微粒體作為體外代謝體系，研究其體外代謝的途徑以及對六種主要CYP450酶(3A，2C，2D，2E1,1A2)相應(yīng)探針底物的代謝影響。為今后進(jìn)一步使用人肝微粒體、基因重組單酶以及體內(nèi)試驗(yàn)、臨床用藥提供參考。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，和厚樸酚代謝具有酶促動力學(xué)代謝特性；CYP3A是介導(dǎo)和厚樸酚在大鼠體內(nèi)生物轉(zhuǎn)化的主要CYP450亞酶，CYP1A2也參與

4、少量和厚樸酚的代謝。提示和厚樸酚與CYP3A酶抑制劑或誘導(dǎo)劑合用可能產(chǎn)生藥物間的相互作用。和厚樸酚體外代謝半衰期(t1/2)，米氏常數(shù)(Km)以及最大反應(yīng)速度Vmax分別為20.63min，0.067mL/min/mg蛋白，163.1μMand7.2μmol/min/g蛋白。和厚樸酚對CYP2D-Dex，2C-Ome，2E1,3A-Tes以及1A2顯示出抑制作用，IC50估值分別為14.4μM，45μM，46μM，94μMand124μ

5、M。濃度范圍未超過140μM時，和厚樸酚對CYP2C-Dic的代謝只有輕微的抑制作用。此外，在濃度小于32μM時，和厚樸酚還顯示出對CYP3A-Tes及1A2的代謝有較弱的促進(jìn)作用。
　　 本實(shí)驗(yàn)未觀察到厚樸酚在大鼠肝微粒體中有明顯代謝，故僅對厚樸酚對主要CYP探針底物代謝活性的影響進(jìn)行了考察厚樸酚對CYP2C-Ome的代謝反應(yīng)有抑制作用，IC50估值為64μM，對3A-Tes，1A2及2D-Dex的代謝反應(yīng)無特別明顯的影響，濃