人類基因ARHGAP18和RGS21的功能初步研究.pdf

1、由三聚體G蛋白和Rho蛋白所介導(dǎo)的信號(hào)通路是體內(nèi)信號(hào)通路系統(tǒng)中極其重要的組成部分，它們的活性受到了嚴(yán)格的調(diào)控，這些調(diào)控因素包括GEF，GAP和GDI，它們分別發(fā)揮了加速結(jié)合，解離及抑制結(jié)合GTP的功能，對(duì)結(jié)合了GTP的三聚體G蛋白和Rho家族蛋白發(fā)揮解離GTP作用的分別是RGS和ARHGAP家族的蛋白。RGS和ARHGAP家族成員眾多，分別構(gòu)成了兩個(gè)超家族，它們中的大部分包含了多個(gè)蛋白—蛋白，蛋白—磷脂相互作用的功能域，這些功能域具有連

2、接多條通路的作用，從而把G蛋白和Rho蛋白所介導(dǎo)的通路置于復(fù)雜的信號(hào)通路網(wǎng)狀中?！　”緦?shí)驗(yàn)室所克隆的RhoT1_v1是RhoT1(即Micro-1)的剪接體，它比RhoT1_V2多第18，19個(gè)外顯子，RhoT1_v2包含18個(gè)外顯子，在心臟，腦，骨骼肌，腎和胰腺中有表達(dá)，它不影響細(xì)胞骨架的變化，發(fā)揮著保持線粒體動(dòng)態(tài)平衡和引起細(xì)胞凋亡的功能。ARHGAP18全長(zhǎng)2901bp，編碼663個(gè)氨基酸殘基，生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)該蛋白含有一個(gè)Rh

3、oGAP和一個(gè)p122-RhoGAP/DLC1功能域。通過(guò)酵母雙雜交實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)它可能與有的蛋白相互作用，通過(guò)酵母驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)它可以與RhoA，Cdc42相互作用，測(cè)定ARHGAP18的GAP活性時(shí)，發(fā)現(xiàn)它能使結(jié)合了GTP的RhoA，Racl，Cdc42和RhoT1vl解離GTP，然而，它的突變體ARHGAP18(R365A)對(duì)這三個(gè)蛋白均沒(méi)有抑制活性。ARHGAP18在NIH3T3細(xì)胞系中都定位于細(xì)胞質(zhì)中，ARHGAP18在NIH3T3細(xì)