過(guò)氧化氫和維生素E對(duì)老年豚鼠耳蝸外毛細(xì)胞大電導(dǎo)鈣激活鉀通道作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、瀘州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文過(guò)氧化氫和維生素E對(duì)老年豚鼠耳蝸外毛細(xì)胞大電導(dǎo)鈣激活鉀通道作用的實(shí)驗(yàn)研究姓名：李林輝申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：耳鼻咽喉科學(xué)指導(dǎo)教師：黎萬(wàn)榮20090401濾波(3IOqz)后輸入計(jì)算機(jī)，采用PClampl01軟件包進(jìn)行分析處理，并選用以下分析指標(biāo)：(1)電流幅值(CurrentAmplitude，Am)：(2)開(kāi)放概率(ProbabilityofOpen，Po)；(3)平均開(kāi)放時(shí)間(MeanOpenTime，To)；

2、(4)平均關(guān)閉時(shí)間(MeanCloseTime，Tc)。3鑒別并分析通道通過(guò)改變鉗制電壓，觀察并記錄在細(xì)胞貼附式和內(nèi)面向外式下BKCa通道開(kāi)放的電壓依賴(lài)性，然后改變?cè)∫褐锈}離子的濃度，使其依次達(dá)到1O10～mol／L、50x10～mol／L、10x10一mol／L、10x10一mol／L，分別觀察和記錄通道開(kāi)放的鈣離子敏感性；然后使用BKCa通道阻滯劑2050mmol／L的四乙基胺(tetraelthylarninonium，TEA)，

3、觀察通道電流幅值的變化。4藥物作用觀察(1)本次實(shí)驗(yàn)中浴槽內(nèi)浴液2ml，在形成高阻封接后，采用細(xì)胞貼附式記錄，依次向浴槽內(nèi)加入不同濃度的H202，使浴液中的藥物終濃度依次達(dá)100黼—OO—gmo!／L一300pmol／L、4009mol／L觀察并記錄不同濃度H202對(duì)BKCa通道的作用，然后用不含藥物的浴液灌洗，觀察通道的恢復(fù)情況；(2)在觀察到3009mol／LH202對(duì)BKCa通道的作用后，不洗脫，加入不同濃度的VitE，使VitE

4、的終濃度分別達(dá)到509mol／L、1009mol／L、1509mol／L、2009mol／L，觀察VitE對(duì)H202激活的BKCa通道的影響。結(jié)果：1在對(duì)稱(chēng)性高鉀溶液中，內(nèi)面向外式記錄到電導(dǎo)為21845士053pS的外向電流，BKCa的平均開(kāi)放時(shí)間To、開(kāi)放概率Po隨電壓增加而增加，反轉(zhuǎn)電位為OmV；在浴液中加入不同濃度的鈣離子后，BKCa通道被明顯激活且具有鈣濃度依賴(lài)性，Po明顯增加；在加入阻斷劑TEA后，通常電流幅值A(chǔ)m呈濃度依賴(lài)性