EGCG對(duì)抑制過(guò)氧化氫體外誘導(dǎo)兔白內(nèi)障形成作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG)對(duì)抑制過(guò)氧化氫誘導(dǎo)體外培養(yǎng)兔晶狀體上皮細(xì)胞凋亡的作用，從而探討EGCG及聯(lián)合維生素C對(duì)晶狀體氧化損傷進(jìn)行藥物治療的可行性。 研究方法：采用體外培養(yǎng)正常家兔晶狀體，按隨機(jī)分組原則將家兔晶狀體分為以下6組：空白對(duì)照組(A)；過(guò)氧化氫（1mmol/L）處理組(B)；過(guò)氧化氫和不同濃度EGCG（10mmol/L、20mmol/L）處理組(C1、C2)；過(guò)氧化氫和不同濃度EGCG（10mmol

2、/L、20mmol/L）聯(lián)合維生素C（1mmol/L）處理組(D1,D2)。分別于24、48、72小時(shí)培養(yǎng)結(jié)束后觀察各組晶狀體的透明度，同等條件下用數(shù)碼相機(jī)拍照并進(jìn)行灰度分析；可見(jiàn)光分光度法測(cè)定晶狀體組織的總抗氧化能力(T- AOC)、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶(SOD)的變化；對(duì)凋亡細(xì)胞予以確認(rèn)和進(jìn)行免疫組化染色，檢測(cè)LECS中凋亡相關(guān)基因bcl-2的表達(dá)；以及采用脫氧核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶缺口標(biāo)記原位細(xì)胞檢測(cè)法（TUNEL）檢測(cè)EG

3、CG對(duì)過(guò)氧化氫誘導(dǎo)的兔晶狀體上皮凋亡細(xì)胞數(shù)量的影響，并進(jìn)行相關(guān)比較及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果： 1、透明度觀察，各實(shí)驗(yàn)點(diǎn)觀察不同濃度EGCG處理組及聯(lián)合用藥組的晶狀體透明性均低于空白對(duì)照組，但高于過(guò)氧化氫處理組，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)； 2、氧化指標(biāo)的觀察，和空白對(duì)照組比較，過(guò)氧化氫處理組T-AOC,SOD,活性明顯降低，MDA含量明顯升高，不同濃度EGCG處理組及聯(lián)合用藥組上述指標(biāo)有不同程度的改善；

4、 3、免疫組化觀察，過(guò)氧化氫組晶狀體上皮細(xì)胞Bcl-2活化表達(dá)顯著下調(diào)。EGCG可以明顯增強(qiáng)晶狀體上皮細(xì)胞Bcl-2活化表達(dá)，且存在一定程度的劑量依賴(lài)性。 4、TUNEL檢測(cè)觀察，過(guò)氧化氫組LECS凋亡率組顯著高于空白對(duì)照組（p<0.05）；過(guò)氧化氫組與不同濃度EGCG處理組及聯(lián)合用藥組比較，有顯著性差異（p<0.05）。 結(jié)論：本研究觀察，發(fā)現(xiàn)EGCG具有抗氧化損傷作用，可抑制過(guò)氧化氫氧化損傷體外所誘導(dǎo)兔晶狀體上皮