EGCG對抑制過氧化氫體外誘導兔白內障形成作用的實驗研究.pdf

1、目的：觀察表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)對抑制過氧化氫誘導體外培養(yǎng)兔晶狀體上皮細胞凋亡的作用，從而探討EGCG及聯(lián)合維生素C對晶狀體氧化損傷進行藥物治療的可行性。 研究方法：采用體外培養(yǎng)正常家兔晶狀體，按隨機分組原則將家兔晶狀體分為以下6組：空白對照組(A)；過氧化氫（1mmol/L）處理組(B)；過氧化氫和不同濃度EGCG（10mmol/L、20mmol/L）處理組(C1、C2)；過氧化氫和不同濃度EGCG（10mmol

2、/L、20mmol/L）聯(lián)合維生素C（1mmol/L）處理組(D1,D2)。分別于24、48、72小時培養(yǎng)結束后觀察各組晶狀體的透明度，同等條件下用數碼相機拍照并進行灰度分析；可見光分光度法測定晶狀體組織的總抗氧化能力(T- AOC)、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶(SOD)的變化；對凋亡細胞予以確認和進行免疫組化染色，檢測LECS中凋亡相關基因bcl-2的表達；以及采用脫氧核苷酸末端轉移酶缺口標記原位細胞檢測法（TUNEL）檢測EG

3、CG對過氧化氫誘導的兔晶狀體上皮凋亡細胞數量的影響，并進行相關比較及統(tǒng)計學分析。 結果： 1、透明度觀察，各實驗點觀察不同濃度EGCG處理組及聯(lián)合用藥組的晶狀體透明性均低于空白對照組，但高于過氧化氫處理組，差異有顯著統(tǒng)計學意義(P<0.05)； 2、氧化指標的觀察，和空白對照組比較，過氧化氫處理組T-AOC,SOD,活性明顯降低，MDA含量明顯升高，不同濃度EGCG處理組及聯(lián)合用藥組上述指標有不同程度的改善；

4、 3、免疫組化觀察，過氧化氫組晶狀體上皮細胞Bcl-2活化表達顯著下調。EGCG可以明顯增強晶狀體上皮細胞Bcl-2活化表達，且存在一定程度的劑量依賴性。 4、TUNEL檢測觀察，過氧化氫組LECS凋亡率組顯著高于空白對照組（p<0.05）；過氧化氫組與不同濃度EGCG處理組及聯(lián)合用藥組比較，有顯著性差異（p<0.05）。 結論：本研究觀察，發(fā)現(xiàn)EGCG具有抗氧化損傷作用，可抑制過氧化氫氧化損傷體外所誘導兔晶狀體上皮