E-selectin在食管癌轉(zhuǎn)移中的作用及cimetidine抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞E-selectin表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分摘要目的:了解E-selectin及其配體sLe A/X在食管癌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞早期粘附中的作用.方法用細(xì)胞粘附試驗(yàn)檢測E-selectin及其配體sLe A和sLe X在食管癌細(xì)胞株EC9706與血管內(nèi)皮細(xì)胞株ECV304早期粘附.結(jié)論:1、E-selectin介導(dǎo)食管癌細(xì)胞株EC9706和內(nèi)皮細(xì)胞株ECV304早期粘附,從體外實(shí)驗(yàn)看E-selectin可能與食管癌轉(zhuǎn)移有關(guān).2、sLe A、sLe X介導(dǎo)食管癌細(xì)胞株EC97

2、06和內(nèi)皮細(xì)胞株ECV304粘附,提示sLe A、sLe X與食管癌轉(zhuǎn)移相關(guān).第二部分摘要目的:了解食管癌細(xì)胞誘導(dǎo)裸鼠肝E-selectin表達(dá).方法將食管癌細(xì)胞株EC9706 5×10<'6>注射到裸鼠脾包膜下,8小時(shí)處死取肝,用RT-PCR和免疫組化了解裸鼠肝血管內(nèi)皮細(xì)胞E-selectin表達(dá).結(jié)論:食管癌細(xì)胞株EC9706誘導(dǎo)裸鼠肝臟E-selectin mRNA轉(zhuǎn)錄,及蛋白表達(dá),表明食管癌細(xì)胞株EC9706可能在肝臟中停留形成

3、轉(zhuǎn)移灶.第三部分摘要目的:了解cimetidine抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞E-selectin表達(dá)的作和機(jī)理,為cimetidine用于腫瘤治療提供理論基礎(chǔ).方法1、用細(xì)胞粘附試驗(yàn)了解cimetidine對食管癌細(xì)胞和臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞早期粘附的影響;2、細(xì)胞ELISA和流式細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測cimetidine對LPS誘導(dǎo)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株E-selectin表達(dá)的影響;3、RT-PCR了解cimetidine對LPS誘導(dǎo)臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株E-select

4、in mRNA表達(dá)的影響;4、食管癌細(xì)胞株EC9706 5×106個(gè)注射到裸鼠脾內(nèi),術(shù)前5天每天注射cimetidine 200mg/kg,2小時(shí)、4小時(shí)、8小時(shí)、16小時(shí)、24小時(shí)處死取血,ELISA檢測血清sE-selectin水平.結(jié)論1、cimetidine在體外能抑制LPS誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞E-selectin表達(dá),但不影響E-selectin mRNA轉(zhuǎn)錄,通過抑制E-selectin表達(dá)而抑制食管癌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞粘附;2、cim

5、etidine能抑制食管癌細(xì)胞株EC9706誘導(dǎo)裸鼠E-selectin表達(dá),特別4~16小時(shí)內(nèi).第四部分摘要目的:建立食管癌肝轉(zhuǎn)移模型,了解cimetidine對食管肝轉(zhuǎn)移的影響.方法將食管癌細(xì)胞株EC9706 5×10<'6>注射到裸鼠脾內(nèi),1小時(shí)后切脾.術(shù)前5天到術(shù)后5天每天cimetidine 200mg/kg腹腔注射,以后口服100mg/kg/day,10周后處死取肝,切片,了解肝轉(zhuǎn)移個(gè)數(shù).結(jié)論:cimetidine能抑制食管