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文檔簡介
1、八氯二丙醚(S<,2>)是農(nóng)藥增效劑的主要品種之一。它對擬除蟲菊酯類農(nóng)藥、氨基甲酸酯類、有機磷類農(nóng)藥均有增效作用,廣泛用于蚊香、噴霧劑、氣霧劑和熏蒸劑,配有增效劑的制劑作為農(nóng)田殺蟲劑的品種制劑,在解決抗藥性的問題上效果良好。關(guān)于S<,2>安全性的研究國內(nèi)外均有報道,包括一般毒性、遺傳毒性、免疫毒性等,但對其遺傳毒性的評價結(jié)論并不一致。為深入探討S<,2>的遺傳毒性,本研究進行了體外細胞培養(yǎng)、整體動物實驗及接觸人群方面的研究。通過DNA蛋
2、白交聯(lián)試驗、微核試驗、蛋白質(zhì)氧化試驗以及DNA合成影響試驗,探討了S<,2>在體外及動物體內(nèi)實驗條件下的遺傳毒性,并從氧化應(yīng)激的角度闡述了其毒性機理;應(yīng)用氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用法檢測了成品S<,2>與生產(chǎn)原料在車間空氣中的濃度,并進行了生產(chǎn)工人DNA蛋白交聯(lián)、p53蛋白等生物指標的監(jiān)測;以及S<,2>與人體血紅蛋白體外相互作用的研究,通過上述研究工作為進一步評價S<,2>的遺傳毒性與毒作用機理,及制定S<,2>生產(chǎn)的職業(yè)衛(wèi)生標準提供科學(xué)依據(jù)
3、。 在體外細胞實驗研究中采用MTT法測出S<,2>對CHL細胞的半數(shù)生長抑制濃度(IC<,50>)為5.478μg/ml。在此基礎(chǔ)上進行氧化損傷實驗,結(jié)果表明,一定濃度的sz在染毒24h及48h時可誘導(dǎo)CHL細胞產(chǎn)生大量羥自由基,從而導(dǎo)致抗氧化酶活性發(fā)生改變,進而影響NO合成與代謝,導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化的發(fā)生。應(yīng)用DNA熒光定量測定方法,檢測了S<,2>對CHL細胞的DNA合成的影響,結(jié)果顯示,染毒濃度為0.20μg/ml及以上時,隨
4、著染毒濃度的增加,DNA合成減少,而在該濃度以下時則表現(xiàn)為DNA合成增加;0.25μg/ml脫離染毒后4、6、12h內(nèi)則表現(xiàn)為DNA合成繼續(xù)減少。采用 SDS-KCL沉淀法檢測了S<,2>對CHL細胞DNA蛋白的交聯(lián)作用,結(jié)果顯示,染毒0.5、1.0、2.0μg/ml濃度的S<,2>可引起CHL細胞DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)率較對照組明顯升高(P<0.05)。同時檢測了S<,2>染毒不同時間對CHL細胞微核率的影響,結(jié)果未見S<,2>有誘發(fā)CH
5、L細胞微核率升高的作用。 在整體動物試驗方面檢測了不同染毒濃度S<,2>(282,564,1128 mg/m<'3>,每天1h,連續(xù)染毒20d)對小鼠各臟器的氧化損傷情況,結(jié)果表明,小鼠肺、肝、脾SOD、GSH-Px的活性高劑量(1128mg/m<'3>)染毒組與對照組比較有顯著性差異(P<0.05);肺MDA含量隨染毒劑量的增加而增加,且呈劑量-反應(yīng)關(guān)系(r=0.987,P<0.05)。各臟器羰基化蛋白含量的測定結(jié)果顯示,肺、
6、肝、脾蛋白出現(xiàn)了不同程度的氧化損傷(P<0.05),其中肺組織蛋白損傷最為明顯,高、中、低劑量組和對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義,且有明顯的劑量-反應(yīng)關(guān)系(r=0.975,P=0.0248),肝、脾組織影響較小,僅高劑量組與對照組比較,差異有顯著性(P<0.05)。在DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)(DPC)方面,肺DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)率隨染毒劑量的增加而增加,高、中、低劑量組與對照組比較,差異均有顯著性,但并不呈劑量-反應(yīng)關(guān)系,肝DPC含量僅高劑量(11
7、28 mg/m<'3>)組與對照組比有顯著性差異(P<0.05),腎、脾則各濃度組之間均未見異常。采用熒光染色法觀察了染毒不同時間對小鼠外周血網(wǎng)織紅細胞微核率的影響,結(jié)果未見S<,2>有誘發(fā)網(wǎng)織紅細胞微核率升高的作用。 應(yīng)用氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用法分析了生產(chǎn)車間空氣中成品與原料的濃度,結(jié)果顯示S<,2>僅在成品出口采樣點檢測到,濃度為1.33 mg/m<'3>,而其它各采樣點均可檢測到三氯乙烯,濃度范圍為0.83~21.82mg/m
8、<'3>,此外在不同的作業(yè)崗位還有二氯甲烷、一氟丙烯、丙烯等有機物的存在。采集S<,2>作業(yè)人群靜脈血檢測氧化損傷、DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)及p53蛋白表達情況,結(jié)果表明,接觸組血.清SOD、GSH-Px酶活性略高低于對照組,差異無顯著性,而脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA的增高與對照組.相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。生產(chǎn)工人DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)率則顯著增高,且這種損傷程度與年齡、吸煙等因素不存在關(guān)聯(lián)性(P>0.05),接觸組血清p53蛋白水平略高于對照組,差異
9、無顯著性,但在接觸組中工齡大于8年的人群血清p53蛋白水平顯著高于工齡小于8年的人群,差異具有顯著性(P<0.05)。另外,為弄清S<,2>與人體血紅蛋白體外相互作用情況,通過超濾法結(jié)合氣相色譜/質(zhì)譜法對s<,2>與血紅蛋白體外相互作用進行測定,結(jié)果表明,在所選擇特定條件下,未經(jīng)代謝的S<,2>不能與人體血紅蛋白結(jié)合形成大分子加合物。 研究表明:S<,2>可導(dǎo)致DNA損傷,除了既往已有的研究提示可造成DNA斷裂、交聯(lián)外,體外細胞
10、實驗顯示,S<,2>可引起CHL,細胞的氧化應(yīng)激反應(yīng),造成膜的脂質(zhì)過氧化,從而引起細胞內(nèi)遺傳物質(zhì)DNA的損傷,表現(xiàn)為DNA蛋白交聯(lián)、DNA合成受到影響;整體動物實驗顯示,S<,2>經(jīng)吸入染毒可誘導(dǎo)機體主要組織臟器肺、肝、脾的脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA和抗氧化酶活性的改變,通過檢測可見,S<,2>能引起組織細胞DNA蛋白交聯(lián)及蛋白氧化,但未能誘發(fā)小鼠外周血網(wǎng)織紅細胞微核率的升高;對接觸人群的檢測發(fā)現(xiàn),s<,2>可引起機體氧化應(yīng)激及血清p53蛋白
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