溫熱順鉑與rAd-p53聯合應用對結腸癌細胞株的作用研究.pdf

1、目的：觀察42℃熱療、順鉑及重組人P53腺病毒(rAd-P53)注射液聯合應用,采用不同的聯合用藥模式對不同P53基因背景的人結腸癌細胞株的殺傷作用,尋找最好的聯合用藥模式,并探討各種用藥模式增效或減效的相關機制。
　　方法：通過Western blot和RT-PCR技術驗證HCT116+/+與HCT116-/-細胞內P53基因背景。采用 MTT法檢測細胞抑制率,繪制細胞生長曲線,分別計算42℃溫熱順鉑單藥與重組人P53腺病毒注射

2、液單藥的IC30。利用Calcusyn軟件計算藥物聯合指數,觀察42℃溫熱順鉑與重組人P53腺病毒注射液不同用藥模式下對不同細胞的抑制作用。并通過光學顯微鏡觀察細胞經過不同處理方式形態(tài)結構的改變,采用流式與Western blot法探討其相關機制。
　　結果：HCT116+/+細胞P53基因野生型,HCT116-/-細胞P53基因缺失型。42℃溫熱順鉑與rAd-P53注射液采用不同的聯合用藥模式下,在不同P53基因背景的腫瘤細胞株

3、中表現出不同的相互作用。但總體規(guī)律療效由好到差依次為:42℃溫熱順鉑與rAd-P53注射液同時用藥組、42℃溫熱順鉑序貫rAd-P53注射液組、rAd-P53注射液序貫42℃溫熱順鉑組。兩種細胞在同種用藥模式下, P53基因缺失型的細胞協(xié)同效果較P53基因野生型的細胞更好。在光學顯微鏡下觀察HCT116+/+細胞經過3種不同的處理方式細胞形態(tài)結構的變化是不同的。流式結果顯示:單藥42℃溫熱順鉑(PH)可以使細胞引起明顯的S期阻滯,rAd

4、-P53注射液則引起明顯的G0/G1期阻滯,42℃溫熱順鉑聯合rAd-P53注射液同時給藥組與42℃溫熱順鉑序貫rAd-P53注射液組表現為G2/M期阻滯,rAd-P53序貫42℃溫熱順鉑表現為G0/G1期阻滯。Western blot結果顯示各治療模式下P53蛋白表與Bax表達均上調,且42℃溫熱順鉑與rAd-P53注射液同時用藥組表達量上調更加明顯。
　　結論：從不同用藥模式下作用效果比較來看,42℃溫熱順鉑與rAd-P53注