
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1、目的:觀察豚鼠耳蝸局部心鈉素(ANP)和一氧化氮合酶(NOS)免疫組化反應(yīng)產(chǎn)物的分布,為研究ANP 和NOS 在豚鼠耳蝸局部血流、淋巴以及神經(jīng)調(diào)節(jié)中的相互作用提供形態(tài)學(xué)依據(jù);初步研究ANP 和一氧化氮(NO)在豚鼠耳蝸血流(CoBF)調(diào)節(jié)中的相互關(guān)系。 方法: (1)采用免疫組織化學(xué)雙標(biāo)法檢測(cè)ANP 和NOS 在正常豚鼠耳蝸的分布特征。 (2)采用免疫熒光化學(xué)雙標(biāo)方法檢測(cè)ANP 和NOS 在豚鼠耳蝸的分布,觀察A
2、NP 和NOS 在同一細(xì)胞內(nèi)的定位特征。 (3)將豚鼠隨機(jī)分為:ANP+左旋精氨酸(L-Arg)組、ANP+生理鹽水組、N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)+ANP 組、L-NAME+ANP +L-Arg 組及L-NAME+生理鹽水組。經(jīng)腹側(cè)打開(kāi)聽(tīng)泡,耳蝸底轉(zhuǎn)鼓階開(kāi)窗分別給予各組藥物,實(shí)驗(yàn)過(guò)程中采用激光多普勒血流量?jī)x監(jiān)測(cè)耳蝸血流量。 結(jié)果: (1)免疫組化雙標(biāo)結(jié)果顯示:在耳蝸各轉(zhuǎn)螺旋動(dòng)脈、血管紋、螺旋緣、螺旋
3、韌帶和Corti 器顯示雙陽(yáng)性染色;耳蝸神經(jīng)節(jié)細(xì)胞及囊斑神經(jīng)細(xì)胞壁及軸突NOS 陽(yáng)性染色,胞質(zhì)ANP 陽(yáng)性染色;蓋膜、前庭膜陰性染色。 (2)免疫熒光雙標(biāo)結(jié)果顯示:蝸軸螺旋動(dòng)脈和血管紋均發(fā)現(xiàn)ANP 和NOS 雙陽(yáng)性表達(dá);螺旋緣、螺旋韌帶、Corti 器、耳蝸神經(jīng)節(jié)細(xì)胞ANP 和NOS 雙陽(yáng)性表達(dá),其中部分耳蝸神經(jīng)節(jié)細(xì)胞呈ANP 陽(yáng)性表達(dá)。 (3)局部給予ANP 可引起CoBF 顯著升高,加用L-Arg 會(huì)引起血流的進(jìn)一步
4、升高。L-NAME 可引起CoBF下降,給予ANP 后CoBF 迅速回升。ANP 所引起的血流變化在使用L-Arg之后仍會(huì)進(jìn)一步升高。對(duì)照組耳蝸血流可見(jiàn)微弱回升。 結(jié)論:由ANP 和NOS 在內(nèi)耳的定位特點(diǎn)可以推斷,二者在耳蝸局部血流調(diào)節(jié),內(nèi)、外淋巴平衡調(diào)節(jié)以及神經(jīng)信號(hào)傳遞等方面可能具有重要作用,二者之間可能存在密切的相互作用機(jī)制。ANP 和L-Arg 單獨(dú)和聯(lián)合作用可不同程度地增加耳蝸血流量,證明NO 和ANP 在CoBF 自
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