藍莓花色苷的分離純化及其初步藥效學實驗研究.pdf

1、藍莓是近幾年來世界上發(fā)展最為迅速的集營養(yǎng)與保健于一身的新興果品，它具有防止腦神經(jīng)老化、強心、抗癌、軟化血管、增強人機體免疫力等多種功能。而其中所含的花色苷類物質對視疲勞的防治作用目前更是倍受關注。 本文以藍莓花色苷為研究對象，對藍莓花色苷的提取、純化、穩(wěn)定性和藥理藥效活性為研究重點，為進一步研究或開發(fā)具有防視疲勞功能保健食品或藥品提供一定的理論依據(jù)。通過實驗研究，獲得了以下幾個方面的結論： 1、藍莓花色苷的提取工藝研究：在提取過

2、程中，溫度、醇濃度、料液比、時間這四個因素對花色苷含量均有一定影響。影響的主次順序分別為醇濃度>溫度>時間>料液比。醇濃度對花色苷的含量影響是極顯著的，溫度和時間的影響是顯著的，而料液比的影響是不顯著的。最終優(yōu)化出的提取方案為溫度50℃，料液比1:10，提取時間1h，醇濃度75％。 2、藍莓花色苷適合用聚酰胺樹脂進行純化，乙醇溶液洗脫。純化條件為：花色苷粗提物上柱后，先用蒸餾水洗脫4個柱體積，然后用50％乙醇洗脫6個柱體積，收集

3、該部分洗脫液，干燥，便為精制的花色苷。通過差異pH法進行測定，所得的花色苷的純度為46.45％，色價為2047，達到了國際上規(guī)定的花色苷類物質醫(yī)藥用品原料含量大于20％，天然色素色價大于40的相關規(guī)定。 3、花色苷穩(wěn)定性研究：研究表明花色苷在酸性條件下是比較穩(wěn)定的，而在堿性條件下是極不穩(wěn)定的；花色苷在溫度小于60℃的條件下較為穩(wěn)定，當溫度大于80℃時，溫度對花色苷有較明顯的降解作用；光對花色苷的穩(wěn)定性影響很大，因此，花色苷在保存

4、和使用過程中，應該盡量避免強光直照；花色苷的抗氧化還原能力很差，因此，應該注意防止氧化，避免和還原劑一起使用；NaCl、蔗糖和防腐劑對花色苷的穩(wěn)定性影響不大，在加工過程中可以放心使用。 4、藍莓花色苷對細胞的氧化損傷研究：用15μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml的藍莓花色苷預先處理過的ECV-304細胞與H2O2損傷組相比，細胞存活率由損傷組的19.09％分別上升至38.67％、68.97％、79.00