MCM7在鼻腔鼻竇鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、鼻腔鼻竇惡性腫瘤總體發(fā)病率較低，其中以鱗狀細(xì)胞癌最常見。鼻腔鼻竇鱗狀細(xì)胞癌(sinonasal squamous cell carcinoma, SNSCC)多為單側(cè)發(fā)病，并表現(xiàn)為一側(cè)鼻腔呈進(jìn)行性鼻塞等常見癥狀，雙側(cè)同時(shí)發(fā)病者較為罕見。鼻腔鼻竇惡性腫瘤總體5年生存率較低，約為40％，并且其發(fā)病的分子生物學(xué)機(jī)制和病理學(xué)基礎(chǔ)還尚不十分明確。所以，由于其起病隱匿、治療手段局限和預(yù)后較差等原因，一直受到臨床醫(yī)師的廣泛關(guān)注。
　　微小染色體

2、維持蛋白7（minichromosome maintenance protein7，MCM7）作為MCMs家族中的重要一員，不僅參與多種限速酶的構(gòu)成及功能調(diào)節(jié)，而且還作為執(zhí)照蛋白參與DNA復(fù)制，調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖活動(dòng)。目前，針對(duì)該因子的研究主要集中在消化和生殖系統(tǒng)惡性腫瘤等方面，并且發(fā)現(xiàn)MCM7的差異化表達(dá)與多種腫瘤患者的預(yù)后相關(guān)，然而在SNSCC方面的相關(guān)研究尚屬空白。
　　目的:本研究旨在通過(guò)應(yīng)用免疫組織化學(xué)（immunohisto

3、chemistry，IHC）技術(shù)檢測(cè)MCM7在SNSCC等組織中的表達(dá)水平，來(lái)探討其在SNSCC發(fā)病機(jī)制中的作用及臨床意義，以求指導(dǎo)臨床早期診斷及合理治療。
　　材料與方法:1、材料:收集2010年12月～2016年5月于中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院耳鼻咽喉科門診活檢及住院手術(shù)切除并經(jīng)病理證實(shí)為SNSCC存檔蠟塊54例，為實(shí)驗(yàn)組。其中，男39例，女15例，年齡范圍39～81歲，平均年齡57.9歲。其中，住院患者41例，7例未接受手術(shù)治

4、療。收集2016年4月于中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院耳鼻咽喉科接受住院手術(shù)治療的慢性鼻竇炎患者鼻息肉（nasal polyps，NP）組織10例，為對(duì)照組。其中，男女各5例，年齡范圍23～54歲，平均年齡35.6歲。
　　2、方法:每個(gè)蠟塊按4μm厚度連續(xù)切片3張。
　　(1)蘇木精-伊紅(Hematoxylin-Eosin，H-E)染色:第1張切片進(jìn)行常規(guī)H-E染色。由有經(jīng)驗(yàn)的病理科醫(yī)師閱片，并再次確診，重新劃分細(xì)胞分化程度。

5、
　　(2) IHC染色:第2張切片采用S-P三步法進(jìn)行MCM7 IHC染色。連續(xù)切片的第3張留存?zhèn)溆谩?br>　　IHC結(jié)果判斷:MCM7以胞核著棕黃色為陽(yáng)性。每張切片高倍鏡(400倍)隨機(jī)觀察5個(gè)視野計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)，每個(gè)視野細(xì)胞數(shù)不少于200個(gè)，并計(jì)算每張切片陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比的平均值，即陽(yáng)性細(xì)胞指數(shù)（Labeling Index，LI），結(jié)果以(x)±s表示。并且，以LI≥0.76為陽(yáng)性。
　　(3)臨床資料整理:收集納入

6、研究的全部腫瘤住院患者病歷，整理相關(guān)資料。疾病診斷方法根據(jù)國(guó)際抗癌聯(lián)盟TNM分類標(biāo)準(zhǔn)第7版進(jìn)行重新整理。
　　(4)腫瘤患者的治療及隨訪:全部Ⅰ、Ⅱ期和部分Ⅲ期SNSCC患者采用鼻內(nèi)鏡鼻腔鼻竇腫瘤切除術(shù)，部分Ⅲ期和全部Ⅳ期患者均采用鼻側(cè)切開或上頜骨切除術(shù)，或根據(jù)具體情況采取擴(kuò)大切除術(shù)，或根據(jù)患者及家屬意愿采取適當(dāng)手術(shù)方式治療，術(shù)后聯(lián)合放射治療?；颊叱鲈汉蠖ㄆ陔S訪至2016年11月1日。34例SNSCC手術(shù)患者均參加隨訪，失訪3例，

7、失訪率為8.82％;最終死亡15例，死亡率44.12％。全部患者生存時(shí)間4.13～70.60個(gè)月，中位生存時(shí)間為38.77個(gè)月。
　　3、統(tǒng)計(jì)分析:采用SPSS22.0軟件包分析處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料采用(x)±s表示，兩個(gè)獨(dú)立樣本的比較采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)。生存分析采用Kaplan-Meier和LogRank檢驗(yàn)。所有結(jié)果均以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　本研究已通過(guò)中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院醫(yī)學(xué)科學(xué)研究

8、倫理委員會(huì)的倫理審批[科倫審[2017]110號(hào)]。
　　結(jié)果:(1)在NP中，MCM7的表達(dá)率較低（LI=0.5729±0.0403），并且表達(dá)MCM7的細(xì)胞分布具有規(guī)律性，主要位于上皮基底層。(2)在SNSCC中，MCM7表達(dá)水平較高(LI=0.7850±0.1208)，并且表達(dá)MCM7的細(xì)胞呈彌漫性分布，無(wú)明顯規(guī)律。(3) SNSCC與NP比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)，MCM7在SNSCC中的表達(dá)水平明顯高于NP

9、。(4) MCM7的表達(dá)與腫瘤分化程度有關(guān)(P=0.001)，隨著腫瘤分化程度的降低MCM7表達(dá)水平逐漸增高。MCM7表達(dá)水平與患者性別(P=0.074)、年齡(P=0.971)、吸煙史(P=0.397)、臨床分期（P=0.656）、頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.431)和原發(fā)部位(P=0.478)無(wú)關(guān)。(5) SNSCC患者的3年、5年生存率分別為61.3％和46.0％。其中，Ⅲ～Ⅳ期患者的3年和5年生存率分別為51.3％和20.9％。MCM