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文檔簡(jiǎn)介
1、第一部分99mTc-tetrofosmin SPECT腫瘤斷層顯像評(píng)價(jià)鼻咽癌治療療效的研究
目的:通過(guò)對(duì)鼻咽癌患者治療不同時(shí)期的99mTc-tetrofosmin(TF)SPECT斷層顯像,觀察99mTc-TF對(duì)鼻咽癌的檢出能力,并通過(guò)觀察其在鼻咽癌放化療后不同時(shí)期在腫瘤部位的濃聚情況,研究其評(píng)價(jià)鼻咽癌治療效果的能力及時(shí)機(jī),從而為臨床上用99mTc-TF診斷鼻咽癌及觀察其放化療療效提供研究基礎(chǔ)。
方法:1.鹽城市第一
2、人民醫(yī)院收治的鼻咽癌患者20例,全部患者均經(jīng)病理證實(shí)為鼻咽癌,行99mTc-TF SPECT斷層顯像。同期在本院行心肌灌注顯像的5例患者作為對(duì)照組。2.患者分別在治療前及治療初期(<11.5Gy)、治療中期(初期顯像后放療5次以上)及治療后(放療總劑量>66Gy)行99mTc-TF SPECT顯像;3.計(jì)算早期顯像的T/N比值作為99mTc-TF顯像攝取指數(shù)(MUI),利用2小時(shí)延遲顯像獲得99Tcm-TF延遲顯像攝取指數(shù)(DUI),同
3、時(shí)計(jì)算滯留率(RI)。RI=(DUI-MUI)/MUI×100%。以接受器工作特性曲線(ROC)分析確定MUI判別閾值,評(píng)價(jià)99mTc-TF SPECT對(duì)鼻咽癌早期放化療療效評(píng)估的價(jià)值。4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±S)表示,數(shù)據(jù)分析采用SPSS19.0軟件,進(jìn)行單因素方差分析(ANOVA)或者t檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:1.20例患者中11例患者為治療前患者,9例患者為治療初期患者。11例治療前患者
4、的MUI為8.74±2.43,而9例治療初期患者的MUI為6.78±3.17,兩者之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);11例治療前患者的DUI為10.41±2.36,9例治療初期患者的DUI為8.39±3.49,兩者之間差異也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。20例鼻咽癌患者治療前及治療初期MUI為7.86±2.89,DUI為9.50±3.02,延遲顯像攝取指數(shù)明顯上升,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。早期顯像病灶部位與對(duì)側(cè)鼻咽部比值為
5、1.57±0.27,對(duì)照組早期顯像兩側(cè)鼻咽部比值為1.14±0.09,兩組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);延遲顯像病灶部位與對(duì)側(cè)鼻咽部比值為1.66±0.25,較早期顯像增高,兩組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。2.18例鼻咽癌患者治療中期SPECT顯像MUI為5.92±1.55,DUI為7.29±2.11。18例早期及延遲皆顯像的鼻咽癌患者延遲顯像攝取指數(shù)較早期顯像明顯上升,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。18例治療中期
6、患者的早期顯像MUI較治療前降低,兩組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);19例治療中期患者的延遲顯像DUI較治療初期也明顯降低,兩組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。3.18例鼻咽癌患者治療結(jié)束SPECT顯像MUI為5.01±1.95,DUI為6.11±2.70,延遲顯像較早期顯像攝取指數(shù)明顯上升,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。MUI和DUI與治療初期顯像比較,明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);與治療中期顯像比較,
7、差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。17例早、中、晚期皆行早期及延遲顯像的患者治療不同時(shí)期滯留指數(shù)分別為0.22±0.05、0.19±0.07及0.19±0.08,三者之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:鼻咽腫瘤部位出現(xiàn)較對(duì)側(cè)及腦部增高的放射性攝取,隨著時(shí)間的延長(zhǎng),腫瘤部位攝取也增加;治療中期顯像示腫瘤部位放射性攝取較治療前及治療早期降低,但與治療后期結(jié)果沒(méi)有明顯差異。本研究證實(shí)了99mTc–TF可用于鼻咽癌顯像,并可為臨床早期評(píng)價(jià)鼻
8、咽癌放療療效提供一種新的檢查方法。
第二部分99mTc-tetrofosmin細(xì)胞結(jié)合早期評(píng)價(jià)鼻咽癌細(xì)胞放療療效的試驗(yàn)研究
目的:通過(guò)測(cè)定放療前及不同劑量放療后24h的99mTc-TF細(xì)胞結(jié)合率,與腫瘤增殖指標(biāo)比較分析,從細(xì)胞學(xué)水平驗(yàn)證99mTc-TF早期觀察鼻咽癌放療療效的可行性。
方法:1.用胰酶消化細(xì)胞、計(jì)數(shù)并接種,培養(yǎng)24h后棄去上清,加入3.7KBq(50μL)99mTc-TF,放置37℃繼續(xù)培養(yǎng)
9、100min,隨后吸去上清液加入上清管;用胰酶消化細(xì)胞,收集后加入細(xì)胞管;用γ測(cè)量?jī)x測(cè)量細(xì)胞的CPM計(jì)數(shù)及上清液CPM計(jì)數(shù),計(jì)算99mTc-TF的細(xì)胞結(jié)合率??瞻讓?shí)驗(yàn)管不含細(xì)胞,作為非特異性吸附。2.將CNE-1細(xì)胞接種在細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,培養(yǎng)24h后,各組分別給予0、2、4、8 Gy單次照射,24h后測(cè)量每瓶細(xì)胞99mTc-TF細(xì)胞結(jié)合率。3.在四塊96孔板上接種細(xì)胞,培養(yǎng)24h至細(xì)胞貼壁后,各組分別給予0、2、4、8 Gy單次照射24h
10、后,分別取出96孔板,每孔加入MTT試劑反應(yīng)4h,加150μL DMSO反應(yīng)15min,在酶標(biāo)分析儀上于492nm波長(zhǎng)檢測(cè)光密度(OD)值,計(jì)算細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率。4.接種細(xì)胞培養(yǎng)24h待細(xì)胞貼壁后,各組分別給予0、2、4、8 Gy單次照射,再培養(yǎng)24h后消化并收集細(xì)胞,用70%的乙醇溶液4℃固定24h,加入500μL的Binding Buffer懸浮細(xì)胞,再加入5μL Annexin V-FITC,繼續(xù)加入5μL PI,混勻;室溫避光反應(yīng)
11、15min;用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡率。5.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,采用SPSS19.0軟件進(jìn)行完全隨機(jī)設(shè)計(jì)的單因素方差分析,照射劑量與其他參數(shù)相關(guān)性采用Spearman相關(guān)檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:1.接受不同劑量照射后24h,與對(duì)照組相比,照射各組的OD值均出現(xiàn)下降,2、4及8Gy組細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率分別為(7.14±1.86)%、(17.44±2.21)%及(33.54±3.51)%
12、,各組之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率隨照射劑量的加大而增加,兩者呈正相關(guān)(r=0.945,P<0.01)。2.不同劑量射線照射CNE-1細(xì)胞后24h,與對(duì)照組比較,流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞早期凋亡率明顯增高,各組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);細(xì)胞早期凋亡率隨著照射劑量的增加而增加,兩者呈正相關(guān)(r=0.969,P<0.01)。3.不同劑量照射CNE-1細(xì)胞24h后,4Gy和8Gy組99mTc-TF細(xì)胞結(jié)合率比對(duì)
13、照組降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);8Gy組99mTc-TF細(xì)胞結(jié)合率較2Gy和4Gy組降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);99mTc-TF細(xì)胞結(jié)合率隨照射劑量的增加而降低,兩者呈負(fù)相關(guān)(r=-0.805,P<0.01)。
結(jié)論:CNE-1細(xì)胞經(jīng)不同劑量射線照射后24h,細(xì)胞生長(zhǎng)受到抑制,早期凋亡率和細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率隨照射劑量的增加而增加,99mTc-TF細(xì)胞結(jié)合率出現(xiàn)降低,與細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率呈負(fù)相關(guān),從細(xì)胞學(xué)水平證實(shí)
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