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文檔簡介
1、目的:最近研究證實游離RNA的存在,其具有腫瘤細胞來源,使之成為了腫瘤研究的熱點。GAPDH mRNA是編碼磷酸甘油醛脫氫酶的看家基因,在所有類型的細胞內(nèi)呈組成性表達,GAPDH mRNA是體液中表達最為豐富的游離RNA之一,測定體液中該基因的拷貝數(shù)可以反映總游離RNA水平。為此,我們采用實時定量逆轉錄聚合酶鏈式反應(PCR)方法測定GAPDH mRNA拷貝數(shù),探討肺癌患者支氣管肺泡灌洗液(BALF)和血漿游離RNA的表達及其臨床意義。
2、 方法:以確診的43例肺癌作為實驗組,17例肺部良性病變作為對照組,采用實時定量PCR方法測定支氣管肺泡灌洗液上清和血漿中游離GAPDH mRNA的拷貝數(shù)。常規(guī)細胞學方法檢測肺泡灌洗液脫落細胞。應用受試者工作特征(ROC)曲線分析方法評價游離RNA診斷價值。采用CA-1500型全自動血凝分析儀測定兩組血液的凝血指標。 結果:(1)肺癌及良性疾病組BALF和血漿中均可檢測到游離RNA的存在。(2)肺癌患者BALF中游離RN
3、A拷貝數(shù)明顯高于肺良性病變組(t=3.457,P=0.001),但血漿中游離RNA兩組比較差別無統(tǒng)計學意義。(3)肺泡灌洗液細胞學檢查腫瘤細胞陽性組游離RNA拷貝數(shù)明顯高于陰性組(t=2.094,P=0.024)。(4)肺癌游離RNA拷貝數(shù)在不同的病理類型、臨床分期中無差異(P>0.05)。(5)ROC曲線分析肺泡灌洗液游離RNA對肺癌的診斷價值:ROC曲線最佳工作點對應的游離RNA拷貝數(shù)對數(shù)、敏感性和特異性分別為4.433、86.0%
4、、76.5%,ROC曲線下面積0.882。當特異性為100%時,診斷的敏感性為53.5%。 (6)肺癌組血漿纖維蛋白原含量明顯高于肺良性疾病組(t=2.427,P=0.018)。(7)肺癌血漿游離RNA拷貝數(shù)的對數(shù)與纖維蛋白含量呈正相關(r=0.668,P<0.05)。 結論:應用熒光定量PCR方法檢測BALF中游離RNA診斷肺癌具有較高的特異性、敏感性,對肺癌的診斷具有一定的價值。肺癌患者血液處于高凝狀態(tài),游離RNA可能參與了
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