丙泊酚和缺血預(yù)處理對(duì)大鼠肺缺血再灌注損傷時(shí)肺細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制探討.pdf

1、目的：觀察丙泊酚(propofol，Pro)、缺血預(yù)處理(ischemic preconditioning，IP)及兩者聯(lián)合應(yīng)用對(duì)大鼠肺缺血再灌注(ischernia reperfusion，IR)損傷時(shí)肺組織細(xì)胞凋亡的影響；并觀察相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax表達(dá)的變化，以初步探討可能的作用機(jī)制。 方法：60只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為以下6組：(1)假手術(shù)組(Sham組，n=10)，術(shù)中僅行右側(cè)開(kāi)胸和右肺門穿帶，機(jī)械通氣3h；(2

2、)單純?nèi)毖M(IS組，n=10)，開(kāi)胸夾閉肺門1h后直接處死動(dòng)物取肺組織；(3)缺血再灌注組(IR組，n=10)，開(kāi)胸夾閉肺門缺血1h后松開(kāi)，再灌注2h；(4)丙泊酚干預(yù)組(Pro組，n=10)，夾閉肺門前30min給予丙泊酚干預(yù)，余同IR組；(5)缺血預(yù)處理組(IP組，n=10)，夾閉肺門前給予夾閉右肺門5min，開(kāi)放5min，反復(fù)3次的缺血預(yù)處理，余同IR組；(6)丙泊酚干預(yù)+缺血預(yù)處理組(Pro+IP組，n=10)，夾閉肺門前30

3、min同時(shí)給予丙泊酚干預(yù)和缺血預(yù)處理，余同IR組。制作大鼠單肺原位熱缺血再灌注模型，各組分別于實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)處死大鼠留取右肺組織，根據(jù)需要處理肺標(biāo)本。測(cè)定肺組織濕/干重比(W/D)；采用光鏡觀察肺組織形態(tài)學(xué)的改變；采用透射電鏡觀察細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)改變；采用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記(TUNEL)法檢測(cè)肺組織細(xì)胞凋亡，并計(jì)算凋亡指數(shù)(apoptosis index，AI)；免疫組化法檢測(cè)肺組織細(xì)胞Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)的

4、變化，并利用圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行半定量分析。 結(jié)果： Sham組幾乎未見(jiàn)凋亡細(xì)胞，IR組、Pro組、IP組及Pro+IP組的W/D、AI值均較Sham組明顯升高(P<0.01或P<0.05)；而Pro組、IP組及Pro+IP組的W/D、AI值均明顯低于IR組(P均<0.01)；Pro+IP組與Pro組、IP組相比W/D、AI顯著下降(P<0.01或P<0.05)。與Sham組相比，IR組Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)明顯上調(diào)(P均<0.

5、01)，而B(niǎo)cl-2/Bax比值下降(P<0.01)；與IR組比較，IP組、Pro+IP組Bax蛋白水平顯著下降(P均<0.05)，而Pro組無(wú)明顯變化(P>0.05)；Pro組、IP組及Pro+IP組Bcl-2蛋白、Bcl-2/Bax比值顯著升高(P<0.01或P<0.05)。IS組與Sham組比較各項(xiàng)指標(biāo)無(wú)明顯變化(P均>0.05)。W/D與AI呈顯著正相關(guān)(r=0.951，P<0.01)，而AI與Bcl-2/Bax比值呈顯著負(fù)相關(guān)