維康醇和維泰醇誘導(dǎo)小鼠黑色素瘤分化的研究.pdf

1、本文主要研究抗腫瘤新藥維康醇和維泰醇對(duì)小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16F0的生長(zhǎng)抑制效應(yīng)及分化誘導(dǎo)作用。
　　通過(guò)將維康醇和維泰醇按照濃度梯度配制后,將藥物作用于B16F0細(xì)胞株48h和24h,用MTT法檢測(cè)維康醇和維泰醇對(duì)腫瘤細(xì)胞的增殖率的影響;用Giemsa染色法觀察維康醇和維泰醇對(duì)B16F0細(xì)胞形態(tài)的影響;用臺(tái)盼藍(lán)拒染法研究維康醇和維泰醇對(duì)B16F0細(xì)胞的致死率的影響;用分光光度法測(cè)定維康醇和維泰醇對(duì)黑色素生成量的影響,多巴氧化法測(cè)定

2、對(duì)酪氨酸酶活性影響RT-PCR法測(cè)定維康醇和維泰醇對(duì)酪氨酸酶及其相關(guān)蛋白Trp1和Trp2 mRNA表達(dá)水平的影響;軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)研究維康醇和維泰醇對(duì)細(xì)胞克隆形成能力的影響;同種動(dòng)物體內(nèi)抑瘤模型研究維康醇誘導(dǎo)分化后B16F0細(xì)胞致瘤能力。
　　結(jié)果顯示,經(jīng)維康醇和維泰醇作用48h和24h后,兩種藥物對(duì)B16F0細(xì)胞的生長(zhǎng)均有明顯的抑制作用,且隨著藥物濃度的增大,均呈現(xiàn)時(shí)間和劑量依賴(lài)性;經(jīng)維康醇和維泰醇作用后,B16F0細(xì)胞的形

3、態(tài)與對(duì)照組相比呈現(xiàn)明顯的變化,出現(xiàn)很多樹(shù)突狀的分支,隨藥物濃度增大分支越來(lái)越明顯;維康醇和維泰醇作用B16F0細(xì)胞后,胞內(nèi)和胞外黑色素含量均明顯增加,酪氨酸酶的活性也明顯升高。維康醇和維泰醇上調(diào)Tyrosinase,Trp-1,Trp-2的mRNA表達(dá)水平;.維康醇和維泰醇使B16F0細(xì)胞的克隆形成率明顯下降,隨著藥物濃度的增大,克隆數(shù)目明顯減少;經(jīng)維康醇誘導(dǎo)分化后的B16F0細(xì)胞,在小鼠體內(nèi)的致瘤性明顯降低。
　　本實(shí)驗(yàn)得出結(jié)論